凋亡檢測試劑盒如何檢測細(xì)胞凋亡

　　在正常細(xì)胞中，磷脂酰絲氨酸只分布在細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細(xì)胞發(fā)生凋亡早期，膜磷脂酰絲氨酸（PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)，這一變化早于細(xì)胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DNA（脫氧核糖核酸）片斷化和細(xì)胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。AnnexinV是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨酸有高度親和力，故可通過細(xì)胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細(xì)胞的胞膜結(jié)合。因此AnnexinV被作為檢測細(xì)胞早期凋亡的靈敏指標(biāo)之一。碘化丙啶（PropidiumIodide,PI）是一種核酸染料,它不能透過完整的細(xì)胞膜，但凋亡中晚期的細(xì)胞和死細(xì)胞由于細(xì)胞膜通透性的增加，PI能夠透過細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅。因此將AnnexinV與PI匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細(xì)胞區(qū)分開來。

　　細(xì)胞凋亡是一個形態(tài)學(xué)概念，對其形態(tài)的觀察是用凋亡檢測試劑盒研究凋亡的基本方法。細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化是多階段的，起初，細(xì)胞間連接和微絨毛消失.細(xì)胞體積縮小，胞漿凝縮，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變疏松并與胞膜融合，形成一個個空抱，核搪體與線粒體等細(xì)胞器聚集，結(jié)構(gòu)尚無明顯改變，細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)逐漸凝聚成新月狀附在核膜周邊，細(xì)胞核固縮呈勻一的致密物，進(jìn)而斷裂成碎塊，此時細(xì)胞膜仍保持完整;然后，胞膜及核膜不斷出芽、脫落，一個細(xì)胞變成數(shù)個大小不等的有膜包裹的凋亡小體;后，凋亡小體被周圍具有吞噬能力的細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等吞噬、消化。在凋亡發(fā)生的全過程中，細(xì)胞膜一直保持完整。同一組織中，不同細(xì)胞發(fā)生凋亡的進(jìn)程并不同步?！?/div>