mRNA合成全流程產(chǎn)品解決方案

更新時(shí)間：2023-06-12 點(diǎn)擊次數(shù)：1479

SARS-CoV-2（coronavirus disease 2019）疫情暴發(fā)以來，各個(gè)國家采取了多種控制措施，但仍造成了大量的感染和死亡病例。世界衛(wèi)生組織（World Health Organization，WHO）統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)顯示，截至2023年2月3日，全球SARS-CoV-2累計(jì)確診病例7.54億例，死亡病例達(dá)到681萬例。目前，雖然我國已經(jīng)解除對(duì)SARS-CoV-2采取的甲類傳染病管控措施，但是SARS-CoV-2（severe acute respiratory syndrome coronavirus 2，SARS-CoV-2）仍然在變異，重復(fù)感染的風(fēng)險(xiǎn)仍然存在。疫苗接種和抗病藥物的使用是控制傳染病的有效手段。而疫苗被認(rèn)為是全球戰(zhàn)勝SARS-CoV-2疫情的最終希望。

自SARS-CoV-2疫情爆發(fā)以來，滅活疫苗、重組蛋白亞單位疫苗、病毒載體疫苗、DNA載體疫苗和mRNA疫苗等五大技術(shù)路線的過百個(gè)疫苗研發(fā)項(xiàng)目在全球緊急啟動(dòng)。mRNA疫苗相比于其他類型的疫苗，具有安全性高、生產(chǎn)成本低、生產(chǎn)周期短，能更好滿足全球疫情對(duì)疫苗劑量的迫切需求以及易于開發(fā)針對(duì)變異病毒株新疫苗等優(yōu)勢，已在全球掀起了研發(fā)高潮。據(jù)統(tǒng)計(jì)，我國大約有16款mRNA SARS-CoV-2在研。疫情退去，后續(xù)上市的疫苗還能獲得多大的商業(yè)化價(jià)值尚未可知，但布局mRNA疫苗是一個(gè)入場mRNA療法這一新興領(lǐng)域的重要步驟。

mRNA疫苗/藥物的工作機(jī)制清晰，經(jīng)由脂質(zhì)納米顆粒包裹的mRNA進(jìn)入體內(nèi)后被細(xì)胞所攝取，納米脂質(zhì)顆粒在胞內(nèi)解開后釋放出mRNA，隨后利用體內(nèi)的氨基酸進(jìn)行自然的蛋白翻譯，從而發(fā)揮其藥物/疫苗功能。mRNA的體外合成制備、保持穩(wěn)定性和細(xì)胞內(nèi)遞送是mRNA藥物/疫苗研發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)。

圖1 mRNA疫苗/藥物原理

其中合成LNP包裹的mRNA流程大致經(jīng)過模板制備、體外轉(zhuǎn)錄、純化和載體包裹等環(huán)節(jié)：

圖2 LNP-mRNA合成流程

圖3 mRNA合成產(chǎn)品總覽（酶法加帽法）

一、模板制備：

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
abs60251	重組高熱穩(wěn)定DNA 聚合酶	1000U
abs44058811	dNTP Mix (25 mM each)	250ul
abs60036	2×Taq PCR Mix	1ml*50
abs60034	2× Xerox PCR Master Mix	1ml×5
abs60056	2×Pfu Master Mix	1ml×5
abs60055	2×Pfu Master Mix（Quick Load）	1ml×5
abs60084	T4 DNA Ligase	500U×10
abs60250	快速多片段DNA組裝預(yù)混液	50T
abs60024	無內(nèi)毒素高純度質(zhì)粒大量快速提取試劑盒	10T
abs60023	無內(nèi)毒素高純度質(zhì)粒小量快速提取試劑盒	50T

二、體外轉(zhuǎn)錄：

分類	貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
酶產(chǎn)品	abs60153	T7 RNA 聚合酶	1000KU
	abs60170	無機(jī)焦磷酸酶	100KU
	abs60172	脫氧核糖核酸酶Ⅰ（DNase Ⅰ）	10000U
	abs60249	重組表達(dá)的鼠源RNase抑制劑	10000U
	abs60150	RNA酶抑制劑	40000U
核苷酸原料	abs60159	ATP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60163	CTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60164	GTP Sodium salt solution（100 mM）	1ml×3
	abs60165	UTP Sodium salt solution（100mM）	1ml×3
修飾堿基	abs60155	假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液	1ml
	abs60156	N1-甲基-假尿苷三磷酸四鈉鹽溶液	1ml
	abs60168	5-甲基-CTP鈉鹽溶液	1ml
	abs60169	5-甲氧基-UTP鈉鹽溶液	1ml
	abs60185	假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液	50ul
	abs60186	N1-甲基-假尿苷三磷酸四鋰鹽溶液	50ul
	abs60187	N6-甲基-ATP鋰鹽溶液	50ul
	abs60188	5-甲基-CTP鋰鹽溶液	50ul
	abs60189	5-甲氧基-UTP鋰鹽溶液	50ul

三、RNA加帽（酶法加帽法）

分類	貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
酶產(chǎn)品	abs60153	T7 RNA 聚合酶	1000KU
	abs60166	2 氧甲基轉(zhuǎn)移酶	50000U
	abs60152	牛痘病毒加帽酶	10000KU
合成帽結(jié)構(gòu)	abs60182	Abs Cap AG	100ul
	abs60183	Abs Cap GG	100ul
	abs60184	Abs Cap AU	100ul
	abs60318	Abs Cap m6AG	10ul
	abs60319	Abs Cap2 AG	10ul
	abs60320	Abs Cap2 m6AG	10ul
	abs60321	體內(nèi)天然帽結(jié)構(gòu)類似物組合	1kit

四、RNA純化及檢測

分類	貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
RNA純化	abs9259	無酶無菌水（DEPC水）	500ml
	abs7992	Oligo(dT)18磁珠（1um）	1ml
	abs7986	羧基磁珠（1um）	10ml
雙鏈RNA 檢測	abs590002	雙鏈RNA（dsRNA）ELISA檢測試劑盒（K1）	96T

五、mRNA相關(guān)其他產(chǎn)品推薦

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	規(guī)格	產(chǎn)品特征
abs60174	Cas9 mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60190	Cas9 nickase mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60176	EGFP mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60178	Fluc mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60180	mcherry mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60192	EBFP mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60193	ECFP mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60195	mBanana mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60196	mHoneydew mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60197	mKate mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60198	mOrange mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60199	mPlum mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60311	mtangerine mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60313	tdTomato mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60314	YFP mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60191	Cre mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60194	EPO mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60312	OVA mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60315	β-gal mRNA	100ug×10	新鮮現(xiàn)貨
abs60332	Endless eGFP mRNA	50ug	新鮮現(xiàn)貨
abs60333	Endless Fluc mRNA	50ug	新鮮現(xiàn)貨
abs60334	Endless mcherry mRNA	50ug	新鮮現(xiàn)貨
abs60335	Endless Cas9 mRNA	50ug	新鮮現(xiàn)貨
abs60336	Endless EPO mRNA	50ug	新鮮現(xiàn)貨
備注：所有工具RNA均使用 Cap AG結(jié)構(gòu)共轉(zhuǎn)錄加帽，修飾堿基5種可任選其一（5-Methoxy-UTP，5-Methyl-CTP，N1-Methylpseudo-UTP，N6-Methyl-ATP，Pseudo-UTP。）