mRNA轉(zhuǎn)染專用利器，讓mRNA轉(zhuǎn)染不再難！

mRNA（信使RNA）轉(zhuǎn)染是一種將外源mRNA引入細胞內(nèi)的技術(shù)，以實現(xiàn)特定蛋白質(zhì)的表達或基因治療的方法。mRNA轉(zhuǎn)染可以繞過基因組中的DNA轉(zhuǎn)錄和核糖體轉(zhuǎn)錄過程，直接將所需的mRNA傳遞到細胞內(nèi)，從而實現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成。

使用mRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)有多種優(yōu)勢：

1）相比于DNA轉(zhuǎn)染，mRNA轉(zhuǎn)染不需要經(jīng)過核轉(zhuǎn)錄和DNA復(fù)制等步驟，可以更快速地實現(xiàn)蛋白質(zhì)的合成；
2）由于mRNA轉(zhuǎn)染不涉及基因組的改變，避免了可能引發(fā)的不良基因突變和免疫應(yīng)答等問題；
3）mRNA轉(zhuǎn)染還具有可調(diào)控性強、轉(zhuǎn)染效率高以及適用范圍廣等優(yōu)點。

在實際應(yīng)用中，mRNA轉(zhuǎn)染被廣泛用于基因治療、疫苗研發(fā)以及細胞工程等領(lǐng)域。mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）是愛必信推出的專為真核細胞進行mRNA轉(zhuǎn)染開發(fā)的mRNA專用轉(zhuǎn)染試劑，可用于在多種貼壁細胞或懸浮細胞中遞送mRNA。可直接將mRNA從細胞外傳遞到細胞質(zhì)中進行表達，這避免了轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用的影響以及進入細胞核的限制，可被廣泛應(yīng)用于短期蛋白表達的相關(guān)研究工作。

產(chǎn)品亮點：

? 專用于mRNA轉(zhuǎn)染，可用于多種貼壁細胞或懸浮細胞；
? 在各種常規(guī)細胞、難轉(zhuǎn)的原代細胞或干細胞中均具有較高的轉(zhuǎn)染效率；
? 不受血清影響，轉(zhuǎn)染前后無需更換培養(yǎng)基；
? 產(chǎn)品性能穩(wěn)定，毒性低，操作簡單，重復(fù)性好。

實驗操作步驟：

以24孔板為例：

1）細胞接種：每孔接種0.5-1.0×10⁵個細胞，細胞培養(yǎng)12-24小時，使轉(zhuǎn)染時細胞密度達到60-70%融合度；
2）mRNA稀釋：將mRNA稀釋于Opti-MEM培養(yǎng)基中，終濃度0.1mg/mL；
3）復(fù)合物制備：取2uL的mRNA轉(zhuǎn)染試劑原液加入到8uL Opti-MEM培養(yǎng)基中，取4uL濃度為0.1mg/mL的mRNA加入到6uL Opti-MEM培養(yǎng)基中，兩者等體積混合；
4）室溫靜置10分鐘；
5）無需等待，每孔20uL復(fù)合物加入細胞培養(yǎng)板中，混勻，37℃培養(yǎng)18-48小時后檢測基因表達，無需更換培養(yǎng)基。

實驗案例展示：

1、適用范圍廣泛：使用Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）在不同類型細胞包括293T細胞、B16F10細胞、MCF-7細胞、LX2細胞、MC38細胞、LLC細胞、MDA-MB-231細胞、Jurkat細胞中轉(zhuǎn)染EGFP mRNA，處理細胞24h后利用熒光顯微鏡拍照，發(fā)現(xiàn)Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）在各類細胞中均取得了較好的轉(zhuǎn)染效果。

圖1 mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）轉(zhuǎn)染EGFP mRNA至各種類型類細胞

2、轉(zhuǎn)染效率高：使用Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）和不同競品mRNA轉(zhuǎn)染試劑在B16F10細胞中轉(zhuǎn)染EGFP mRNA，處理細胞24h后，利用流式細胞儀檢測EGFP mRNA的轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果表明不同比例的Abisn mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）轉(zhuǎn)染效率均高于競品轉(zhuǎn)染試劑。

圖2 mRNA轉(zhuǎn)染試劑（abs60339）不用轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染效率對比結(jié)果

備注：圖例中不同柱子顏色代表轉(zhuǎn)染試劑和mRNA的比例[轉(zhuǎn)染試劑體積（μL）:mRNA的質(zhì)量（μg）]，縱坐標的數(shù)值代表轉(zhuǎn)染效率。

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