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    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    更新時間:2024-04-18      點擊次數(shù):1034

    隨著愛必信的發(fā)展與完善,我們的產(chǎn)品受到越來越多的老師信賴,今天帶大家解讀一篇滿眼都是愛必信的文章。


    文獻信息


    題目:Regulation of the migration of colorectal cancer stem cells via the TLR4/MyD88 signaling pathway by the novel surface marker CD14 following LPS stimulation

    雜志:Oncology Letters 27.2 (2024): 60.

    作者:Li Y, Shi J, Liu Z, et al


    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 文獻引用產(chǎn)品信息


    研究背景


    結(jié)直腸癌(CRC)是全球癌癥相關(guān)死亡的主要原因之一,主要原因與CRC干細胞(CCSCs)引起的術(shù)后癌癥復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移或癌細胞耐藥有關(guān),CCSCs缺乏一致和可靠的標記物限制了它們在臨床實踐中的使用。為了啟動促炎反應(yīng),脂多糖(LPS)和CD14(單核細胞、巨噬細胞和中性粒細胞的一種特殊表面標志物)通過Toll樣受體4(TLR4)信號通路相互作用,此外,脂多糖通過TLR4信號通路促進結(jié)直腸癌的發(fā)展和轉(zhuǎn)移,CD14與腫瘤的復(fù)發(fā)、生長、轉(zhuǎn)移和治療耐藥有關(guān),這與CSC的特征(如復(fù)發(fā)、生長、轉(zhuǎn)移和耐藥)是一致的,這表明CD14可能與CCSCs相關(guān)。


    研究方法


    本研究采用免疫熒光雙標記法檢測CD133和CD14,定量評估結(jié)直腸癌組織和癌旁組織石蠟包埋切片CCSCs中CD14的表達。隨后,從結(jié)直腸癌組織中提取CD14+細胞,通過分析增殖、腫瘤親和性和治療耐藥性來檢測其干性特征,以證實表型鑒定。此外,遷移的體外檢測能夠檢測CD14的功能。


    研究結(jié)果


    1、癌旁組織相比,所有結(jié)直腸癌組織中CD14和CD133共表達的陽性率均顯著升高。


    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 CD14在CD133標記的結(jié)直腸csc中表達


    2、EdU和CCK-8檢測結(jié)果顯示結(jié)腸癌CD14+細胞表現(xiàn)出強的增殖能力。


    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 結(jié)腸癌CD14+細胞表現(xiàn)出增強的增殖能力

    (CCK-8購自愛必信abs50003 CCK-8試劑盒)


    3、細胞克隆實驗表明,與CD14-細胞相比,CD14+細胞更大,核分裂增加,聚集成簇。用裸鼠異種移植實驗表明植入45天后,CD14+細胞組的腫瘤明顯大于CD14-細胞組。


    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 CD14+細胞在結(jié)腸癌中具有致瘤性


    4、耐藥性分析。CD14+組和CD14-組細胞的IC50分別為2.554和17.02mg/L表明與陰性組相比,陽性組的耐藥性增加。


    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 CCK-8測定5-FU對CD14+和CD14-細胞48h的IC50效應(yīng)曲線


    5、Transwell實驗結(jié)果顯示,與對照組相比,內(nèi)毒素組表現(xiàn)出更強的遷移能力,而內(nèi)毒素+中和抗體組的遷移能力比對照組更強(圖A)。創(chuàng)面愈合實驗表明,內(nèi)毒素組的細胞遷移能力明顯高于內(nèi)毒素+中和抗體組(圖B)。RT-qPCR結(jié)果顯示MyD88基因表達水平以內(nèi)毒素組最高(圖C),Western blotting顯示TLR4和MyD88蛋白的表達在內(nèi)毒素+中和抗體組和內(nèi)毒素組均顯著高于對照組,其中內(nèi)毒素組的增加更明顯(圖D)。

    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    三生有幸,舶來品韶華流光里,俯仰皆是Absin

    圖 內(nèi)毒素影響細胞遷移

    (RIPA裂解液abs9229、彩色PAGE快速凝膠試劑盒(10%)abs9367、ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒abs920、 TLR4抗體abs132000、MyD88抗體abs135682、LPSabs47014848, 細胞快速RNA提取試劑盒 abs60027)

    常規(guī)裂解液對比


    品名

    RIPA裂解液(弱)

    RIPA裂解液(中)

    RIPA裂解液(強)

    貨號-規(guī)格

    abs9230-100mL

    abs9228-100mL

    abs9229-100mL

    成分表

    50mM Tris-HC(pH7.4)

    50mM Tris-HC(pH7.4)

    50mM Tris-HC(pH7.4)

    150mM NaCl

    150mM NaCl

    150mM NaCl

    1%NP-40

    1%NP-40

    1%Triton X-100

    0.25% 脫氧膽酸鈉

    0.5% 脫氧膽酸鈉

    1% 脫氧膽酸鈉


    0.1% SDS

    0.1% SDS

    以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

    以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

    以及正釩酸鈉,氟化鈉,EDTA和抑肽酶等多種抑制劑

    特點

    不含高濃度去垢劑

    有較高濃度的去垢劑,不適合用Bradford法來測定總蛋白濃度

    有較高濃度的去垢劑,不適合用Bradford法來測定總蛋白濃度

    裂解強度

    溫和

    膜蛋白

    一般

    較好

    很好

    胞漿蛋白

    很好

    很好

    很好

    核蛋白

    較好

    較好

    很好

    應(yīng)用推薦

    WB,IP,Co-IP

    WB,IP

    WB,IP,Co-IP





    本期好物推薦


    類別

    貨號

    產(chǎn)品名稱

    規(guī)格

    樣本處理

    abs9346

    細胞漿、細胞核及細胞膜蛋白抽提試劑盒

    50T

    abs9116

    免疫印跡及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液

    100mL

    abs9162

    廣譜型磷酸酶抑制劑混合物(100×儲液)

    1mL

    abs9161

    廣譜型蛋白酶抑制劑混合物(不含EDTA,100×DMSO儲液)

    1mL

    蛋白定量

    abs9232

    BCA蛋白定量試劑盒

    500T

    配膠試劑盒、Glass gel預(yù)制膠、Plastic gel預(yù)制膠、abs93系列預(yù)制膠

    上樣與電泳

    abs953

    上樣緩沖液(2×)

    10mL

    abs9829

    上樣緩沖液(5×)

    10mL

    abs951

    電泳液(10×)

    100mL

    abs923

    預(yù)染蛋白Marker(10-245kDa)

    500uL

    轉(zhuǎn)膜

    abs932

    PVDF膜(0.45μm)

    20張

    abs960

    NC膜(0.45μm)

    20張

    abs950

    電轉(zhuǎn)液(10×)

    100mL

    封閉

    abs9175

    脫脂奶粉

    500g

    abs9157

    牛血清白蛋白

    100g

    抗體稀釋與去除

    abs954

    WB專用一抗二抗稀釋液

    100mL

    abs967

    Western一抗二抗去除液(強堿性)

    500mL

    顯色與檢測

    abs920

    ECL化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒

    25mL×2






    Absin產(chǎn)品線:
    爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...
    特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...


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