Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒

簡要描述：Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒包含3個組分，分別為AnnexinV-FITC、10×Binding Buffer、Propidium Iodide

產(chǎn)品型號：abs50001
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2025-11-20
訪問量：4484

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Product Category

細胞生物學

重組蛋白原代細胞分離細胞培養(yǎng) 細胞檢測細胞/組織處理外泌體研究其它動物血清 3D/類器官培養(yǎng)

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詳細介紹

品牌	absin	貨號	abs50001
規(guī)格	25T；50T；100T	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合

Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒

產(chǎn)品描述

描述

在正常細胞中，磷脂酰絲氨只分布在細胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)側(cè)，細胞發(fā)生凋亡最早期，膜磷脂酰絲氨PS）由脂膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)，這一變化早于細胞皺縮、染色質(zhì)濃縮、DNA片斷化和細胞膜的通透性增加等凋亡現(xiàn)象。Annexin V是一種磷脂結(jié)合蛋白，與磷脂酰絲氨有高度親和力，故可通過細胞外側(cè)暴露的磷脂酰絲氨與凋亡早期細胞的胞膜結(jié)合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）是一種核酸染料, 它不能透過完整的細胞膜，但凋亡中晚期的細胞和死細胞由于細胞膜通透性的增加，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核染紅。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將處于不同凋亡時期的細胞區(qū)分開來。

產(chǎn)品組分

	25 Tests	50 Tests	100 Tests
AnnexinV-FITC	125μl	250μl	500μl
10×Binding Buffer	1.5ml	2.5ml	6.5ml
Propidium Iodide	125μl	250μl	500μl

操作步驟

貼壁細胞需用 0.25%的消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加 2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的胰消化時，注意必須清除EDTA：在標記前用 1×PBS或 1×binding buffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2+螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將 10×Binding Buffer 稀釋成 1×Binding Buffer；
（2）細胞收集：懸浮細胞收集：離心 5 分鐘；貼壁細胞：用不含EDTA的胰消化收集后（注：胰消化時間不宜過長，否則會影響細胞膜上磷脂酰絲氨與Annexin V-FITC 的結(jié)合），在室溫中，2000rpm 離心 5～10 分鐘，收集細胞；
（3）細胞洗滌：用預(yù)冷 1×PBS（4℃）重懸細胞一次，2000rpm 離心 5～10分鐘，棄上清洗滌細胞；
（4）加入 300μL 的 1×Binding Buffer 懸浮細胞；
（5） Annexin V-FITC 標記：加入 5μL 的 Annexin V-FITC 混勻后，避光，室溫孵育 15 分鐘；
（6） PI 標記：上機前 5 分鐘再加入 5μL 的 PI 染色。
（7）上機前，補加 200μL 的 1×Binding Buffer。
注意：每個反應(yīng)體系建議細胞數(shù)為1×104至1×106個

操作說明

（1）使用前低速離心，以免液體積存管蓋和管壁；
（2）本試劑只適用于實驗，不適用于臨床檢測；
（3） PI（propidium iodide，溴化丙錠）有毒性，能通過皮膚吸收，對眼睛有刺激作用，使用時需戴手套；
（4） Annexin V-FITC 和 PI 是光敏物質(zhì)，在操作時請注意避光。在處理和標記時，盡可能在暗處進行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（5）整個操作過程動作要盡量輕柔，勿用力吹打細胞，盡量在 4℃下操作，以免影響細胞狀態(tài)。
（6）在細胞洗滌的最后一步，請盡量將上清棄凈，以免 PBS 殘留，有可能會影響實驗結(jié)果。
（7）為防止熒光衰變，宜在 1 小時內(nèi)進行流式檢測。
（8） PI 染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高，建議首先進行Annexin V-FITC 染色，最短可在上機前 5 分鐘再加入 PI 染色。

基本信息

別名

Annexin V-FITC apoptosis assay kit

儲存/保存方法

4℃保存6個月；避免反復凍融。

研究領(lǐng)域
研究領(lǐng)域	Drug DiscoveryAntibody DrugStructural Characterization and Analysis

實驗結(jié)果圖

FITC Annexin V 染色的流式細胞術(shù)分析。 Human PBMC用 12 uM 處理 4 小時。將細胞與 FITC Annexin V 在含有碘化丙啶 (PI) 的緩沖液中孵育，并通過流式細胞術(shù)進行分析。經(jīng)過 2 小時的處理，主要有三組細胞：活細胞（FITC Annexin V 和 PI 陰性）和凋亡早期（FITC Annexin V 陽性和 PI 陰性）和 FITC Annexin V 和 PI 雙陽性的細胞

Annexin V-FITC/PI細胞凋亡檢測試劑盒溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究

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