Products產(chǎn)品中心

首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 免疫學(xué)試劑 > 多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC） > abs50015七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒

七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒

簡(jiǎn)要描述：七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒的檢驗(yàn)原理：多重?zé)晒饷庖呓M化染色是基于抗原、抗體特異性結(jié)合的原理，選用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗抗體，對(duì)試劑盒中的熒光染料進(jìn)行活化，將信號(hào)共價(jià)結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標(biāo)記，通過(guò)多輪染色循環(huán)實(shí)現(xiàn)組織或細(xì)胞的原位多靶點(diǎn)染色。

產(chǎn)品型號(hào)：abs50015
廠(chǎng)商性質(zhì)：生產(chǎn)廠(chǎng)家
更新時(shí)間：2025-10-28
訪(fǎng) 問(wèn) 量：6031

產(chǎn)品咨詢(xún)聯(lián)系我們

產(chǎn)品分類(lèi)

Product Category

免疫學(xué)試劑

ELISA IHC/IF常用試劑流式細(xì)胞術(shù) 互作多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC） WB常用試劑其它免疫學(xué)試劑

查看全部

相關(guān)文章

詳細(xì)介紹

品牌	absin	貨號(hào)	abs50015
規(guī)格	20T;100T	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	主要用于人源或小鼠組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合

概述

別名

多色試劑盒;七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒

描述

組織微環(huán)境中有復(fù)雜的細(xì)胞組成，這些細(xì)胞的表型、狀態(tài)、豐度、分布都有著重要的生物學(xué)意義和臨床價(jià)值。借助抗體染色可以將其在組織原位上呈現(xiàn)出來(lái)。免疫組化染色是一種研究組織形態(tài)和原位蛋白表達(dá)的常見(jiàn)技術(shù)，常規(guī)IHC檢測(cè)只能展示單一指標(biāo)，難以呈現(xiàn)復(fù)雜的組織微環(huán)境中的細(xì)胞組成、狀態(tài)和關(guān)系，而這些信息對(duì)疾病的診斷和治療至關(guān)重要！
酪氨信號(hào)放大技術(shù)原理：類(lèi)似常規(guī)免疫組化的DAB顯色方法，TSA技術(shù)同樣采用HRP標(biāo)記的二抗，HRP催化加入體系的熒光素底物，產(chǎn)生活化熒光底物，活化底物可與抗原上的酪氨suan共價(jià)結(jié)合，使樣品上穩(wěn)定的共價(jià)結(jié)合熒光素。之后用熱修復(fù)法洗去非共價(jià)結(jié)合的抗體，換下一種一抗來(lái)第二輪孵育，換另一種熒光素底物，如此往復(fù)就可實(shí)現(xiàn)多重標(biāo)記。七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒

檢驗(yàn)原理

多重?zé)晒饷庖呓M化染色是基于抗原、抗體特異性結(jié)合的原理，選用辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的二抗抗體，對(duì)試劑盒中的熒光染料進(jìn)行活化，將信號(hào)共價(jià)結(jié)合到抗原上。借助于不同的熒光染料標(biāo)記，通過(guò)多輪染色循環(huán)實(shí)現(xiàn)組織或細(xì)胞的原位多靶點(diǎn)染色。

產(chǎn)品組成

規(guī)格	abs50015（鼠兔）七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒
規(guī)格	組分	TSA520	TSA540	TSA570	TSA620	TSA650	TSA700	DAPI 100x	信號(hào)放大液	HRP標(biāo)記二抗	抗熒光淬滅封片劑
100T	體積	100ul	100ul	100ul	100ul	100ul	100ul	100ul	60ml	60ml	5ml*2
50T		50ul	50ul	50ul	50ul	50ul	50ul	100ul	30ml	30ml	5ml
20T		20ul	20ul	20ul	20ul	20ul	20ul	100ul	12ml	12ml	5ml

TSA單色熒光染料520、TSA單色熒光染料540、TSA單色熒光染料570、TSA單色熒光染料620、TSA單色熒光染料650、TSA單色熒光染料700、信號(hào)放大反應(yīng)液、鼠兔通用型HRP標(biāo)記二抗、抗熒光淬滅封片、DAPI

應(yīng)用

七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒主要用于組織、石蠟切片、TMA芯片的免疫組化染色。也可用于冰凍切片和細(xì)胞爬片，需搭配abs994 抗體洗脫液（mIHC專(zhuān)用）。

使用方法

一、樣本要求
1、福爾馬林固定的蠟塊或玻片，大塊組織或TMA，封蠟不能有明顯的破損。
2、玻片樣本，組織需要緊貼玻片，避免褶皺，玻片不能有破損、劃傷或污漬。
3、組織最小應(yīng)包含大于1000個(gè)細(xì)胞。
4、蠟塊需包埋實(shí)體瘤組織，壞死瘤組織、細(xì)針穿剌物、細(xì)胞甩片樣品會(huì)影響染色效果。
5、組織應(yīng)當(dāng)用10%中性福爾馬林固定，正常固定時(shí)間為18-24h。
6、切片厚度為4um左右，使用防脫玻片。建議玻片在固定后一周內(nèi)制備為佳。
7、不要在水浴撈片環(huán)節(jié)添加任何粘合劑，樣本應(yīng)置于玻片正面、中央。將撈片豎直置于吸水紙上去除水分，輕敲去除水滴，不要用紙擦拭玻片。
8、玻片置于45℃熱盤(pán)上放置30min（自然風(fēng)干玻片時(shí)長(zhǎng)不小于1h）。

二、檢驗(yàn)方法
1、所需儀器設(shè)備：移液器、恒溫干燥箱、微波爐、免疫組化筆、修復(fù)杯、染色缸、計(jì)時(shí)器、孵育濕盒、蓋玻片、通風(fēng)櫥、洗瓶、熒光顯微鏡、量筒100ml、量筒1000ml等。
2、所需試劑：滅菌去離子水（abs9259）、二甲苯、乙醇（100%、95%、70%）、10%中性福爾馬林、抗原修復(fù)一抗、封閉液、TBST等。
3、試劑準(zhǔn)備：
1）熒光染料的稀釋?zhuān)?/span>染料為100×母液，使用信號(hào)放大反應(yīng)液按1:100稀釋制備染料工作液（現(xiàn)用現(xiàn)配）；DAPI使用無(wú)菌水按1:100稀釋制備工作液。
2）二抗的使用：試劑盒為鼠兔通用二抗，不建議樣本與二抗同源，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)核實(shí)一抗種屬是否匹配。
4、檢測(cè)設(shè)備：熒光顯微鏡或熒光全片掃描設(shè)備，TSA單色熒光染料適用的激發(fā)和發(fā)射濾光片應(yīng)符合表中的建議。

三、石蠟切片操作步驟
1、脫蠟水合
a）新鮮二甲苯浸片10min，重復(fù)3次。
b）梯度乙醇浸片：100% 5min；95% 5min；70% 2min。
c）滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。
d）10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛浸片10-30min，滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，視樣本質(zhì)量而定）
e）滴加破膜劑通透15min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，一般情況下可不做）
2、微波修復(fù)抗原
a）將脫蠟水合后的玻片置于修復(fù)杯中，用抗原修復(fù)液1×工作液浸沒(méi)。
b）將修復(fù)杯置于微波爐內(nèi)高火煮沸。
c）低火維持15min（注意補(bǔ)液，防止蒸發(fā)過(guò)度導(dǎo)致干片）。
d）取出室溫自然冷卻至室溫。
3、淬滅和封閉
a）去除玻片上殘存洗液。
b）用組化筆圈出玻片上的樣本區(qū)域，滴加3%過(guò)氧化氫覆蓋樣本區(qū)域，孵育10min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。
c）去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。
4、一抗孵育
a）去除玻片上的封閉液。
b）用移液器滴加稀釋的一抗溶液，浸沒(méi)樣本區(qū)域。
c）室溫保濕震蕩孵育1h（需針對(duì)不同抗體做優(yōu)化調(diào)整）。
d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。
5、二抗孵育
a）去除玻片上殘存的洗液。
b）直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸沒(méi)樣本區(qū)域。
c）室溫保濕孵育10min。
d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。
6、熒光染色放大信號(hào)
a）去除玻片上殘存的洗液。
b）用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100ul（使用信號(hào)放大液按1:100稀釋?zhuān)┙](méi)樣本區(qū)域。
c）室溫保濕震蕩孵育10min。
d）1×TBST buffer浸洗玻片，室溫浸片3min。重復(fù)3次。
e）微波修復(fù)，室溫自然冷卻至室溫。
f）滅菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。
7、新一輪染色（單染可直接進(jìn)行第8步）
a）每輪染色結(jié)束后可用熒光顯微鏡確認(rèn)染色情況，注意用TBST覆蓋樣品，防止干片。
b）封閉：去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。（無(wú)需淬滅步驟）
c）重復(fù)步驟4-6
d）多輪染色重復(fù)步驟7，a）— c）結(jié)束后進(jìn)行染核及封片
8、染核及封片
滴加1×DAPI工作液到樣品上，浸沒(méi)樣本區(qū)域，室溫孵育5min。用1×TBST浸洗玻片3次，每次2min。然后滴加抗熒光淬滅封片劑，用蓋玻片封片，避免氣泡，長(zhǎng)期保存請(qǐng)用透明指甲油對(duì)蓋玻片邊緣進(jìn)行密封。
9、閱片，對(duì)染色后的組織片在熒光顯微鏡下觀(guān)察并分析。

四、冰凍切片操作步驟（需搭配抗體洗脫液abs994）

1、淬滅、通透、封閉

a）從冰箱中取出冷凍玻片，恢復(fù)至室溫，PBST浸洗3min，重復(fù)3次

b）10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛浸片10-30min，滅菌水洗片1min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，視樣本質(zhì)量而定）

c）滴加破膜劑通透15min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。（可選項(xiàng)，一般情況下可不做）

d）用組化筆圈出玻片上的樣本區(qū)域，滴加3%過(guò)氧化氫覆蓋樣本區(qū)域，孵育10min，PBST浸洗3min，重復(fù)3次。

e）去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。

2、一抗孵育

a）去除玻片上的封閉。

b）用移液器滴加稀釋的一抗溶液，浸沒(méi)樣本區(qū)域。

c）室溫保濕震蕩孵育1h（需針對(duì)不同抗體做優(yōu)化調(diào)整）。

d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。

3、二抗孵育

a）去除玻片上殘存的洗液。

b）直接滴加HRP二抗工作液溶液，浸沒(méi)樣本區(qū)域。

c）室溫保濕孵育10min。

d）用1×TBST buffer浸洗玻片3min，重復(fù)1次。

4、熒光染色放大信號(hào)

a）去除玻片上殘存的洗液。

b）用移液器在玻片上滴加1×染料工作液100ul（使用信號(hào)放大液按1:100稀釋?zhuān)┙](méi)樣本區(qū)域。

c）室溫保濕震蕩孵育10min。

d）1×TBST buffer浸洗玻片，室溫浸片3min。重復(fù)3次。

e）滴加抗體洗脫液（abs994），37℃孵育15-20min。

f）滅菌水洗片1次，1×TBST buffer浸片2min。

5、新一輪染色（單染可直接進(jìn)行第6步）

a）每輪染色結(jié)束后可用熒光顯微鏡確認(rèn)染色情況，注意用TBST覆蓋樣品，防止干片。

b）封閉：去除玻片上殘存洗液，滴加封閉液，覆蓋樣本區(qū)域，室溫保濕震蕩10-30min，除去封閉液。

c）重復(fù)步驟2-4。

d）多輪染色重復(fù)步驟5，結(jié)束后進(jìn)行染核及封片。

6、染核及封片

滴加1×DAPI工作液到樣品上，浸沒(méi)樣本區(qū)域，室溫孵育5min。用1×TBST浸洗玻片3次，每次2min。然后滴加抗熒光淬滅封片劑，用蓋玻片封片，避免氣泡，長(zhǎng)期保存請(qǐng)用透明指甲油對(duì)蓋玻片邊緣進(jìn)行密封。

7、閱片，對(duì)染色后的組織片在熒光顯微鏡下觀(guān)察并分析。

五、結(jié)果說(shuō)明：

1、微波修復(fù)抗原、孵育時(shí)間、溫度的改變均有可能得出錯(cuò)誤結(jié)果。

2、在每次染色過(guò)程中，必須有組織陽(yáng)性對(duì)照和試劑陰性對(duì)照實(shí)驗(yàn)同時(shí)進(jìn)行。

3、若陽(yáng)性組織對(duì)照不能顯示陽(yáng)性染色，則應(yīng)判定該批次樣本的檢測(cè)結(jié)果無(wú)效。

六、產(chǎn)品性能指標(biāo)：

1、符合性：取符合性組織片（包括陽(yáng)性組織片和陰性試劑對(duì)照），經(jīng)相應(yīng)的免疫組化試驗(yàn)后，陽(yáng)性對(duì)照染色結(jié)果為陽(yáng)性，陰性對(duì)照染色結(jié)果為陰性。

2、批內(nèi)重復(fù)性：取同一批次的試劑盒，檢測(cè)同一組織切片3片，染色結(jié)果應(yīng)一致。
多重?zé)晒饷庖呓M化（mIHC）實(shí)驗(yàn)操作演示視頻
七、染料信息表格

染料名稱(chēng)	波長(zhǎng)		相似熒光染料	推薦顏色設(shè)置
染料名稱(chēng)	激發(fā)波長(zhǎng)	發(fā)射波長(zhǎng)	相似熒光染料	推薦顏色設(shè)置
DAPI	360	461	DAPI
TSA單色熒光染料480	450	480	Opal480/Aqua
TSA單色熒光染料520	490	520	FITC/AF488/Opal520
TSA單色熒光染料540	520	540	AF514/Opal540
TSA單色熒光染料570	550	570	CY3/AF555/Opal570
TSA單色熒光染料620	590	620	AF594/Opal620/TexasRed
TSA單色熒光染料650	630	650	CY5/AF610/Opal650
TSA單色熒光染料690	640	670	AF647/CY5/Opal670
TSA單色熒光染料700	680	702	AF680/CY5.5/Opal690
TSA單色熒光染料770	740	780	CY7/Opal780

八、其他產(chǎn)品推薦

分類(lèi)	貨號(hào)	產(chǎn)品名稱(chēng)	規(guī)格
固定	abs9179	4%多聚甲醛（通用型組織固定液）	500mL
包埋（冰凍樣本）	abs9756	OCT包埋劑	110mL
抗原修復(fù) （石蠟切片）	abs9342	Tris-EDTA抗原修復(fù)液（10×，pH9.0）	100mL
抗原修復(fù) （石蠟切片）	abs9248	檸檬酸鈉抗原修復(fù)液（50×）	100mL
抗體洗脫（無(wú)法采用熱修復(fù)進(jìn)行洗脫的樣本，如細(xì)胞、冰凍、骨組織等）	abs994	抗體洗脫液（mIHC專(zhuān)用）	30mL
細(xì)胞通透（胞內(nèi)指標(biāo)需要）	abs9149	曲拉通X-100	100mL
淬滅內(nèi)源性過(guò)氧化物酶	abs9333	過(guò)氧化物酶封閉液（H2O2法）	100mL
淬滅內(nèi)源性過(guò)氧化物酶	abs9152	吐溫-20	500mL/2.5L
封閉（二抗同來(lái)源血清）	abs933	山羊血清	500mL
封閉（二抗同來(lái)源血清）	abs9157	牛血清白蛋白	100g
一抗	abs1	組化抗體
一抗	abs9299	一抗二抗稀釋液	100mL
多色試劑盒（含有TSA染料、DAPI、封片劑、二抗、信號(hào)放大液）	abs50165	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（770染料增強(qiáng)版）（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50166	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（770染料增強(qiáng)版）（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50015	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50037	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（plus）（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50031	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50038	七色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（plus）（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50014	六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50049	六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（plus）（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50030	六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50048	六色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（plus）（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50013	五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50029	五色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50012	四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（鼠兔通用二抗）	20T/50T/100T
	abs50028	四色多重?zé)晒饷庖呓M化染色試劑盒（抗兔二抗）	20T/50T/100T
	abs50089	三色多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒（鼠兔通用二抗）	100T
	abs50088	三色多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒（抗兔二抗）	100T
	abs50087	雙色多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒（鼠兔通用二抗）	100T
	abs50086	雙色多重?zé)晒饷庖呓M化試劑盒（抗兔二抗）	100T
肺癌Panel （含一抗）	abs50083	肺癌腫瘤微環(huán)境多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)試劑盒（I）	20T
肺癌Panel （含一抗）	abs50084	肺癌腫瘤微環(huán)境多重?zé)晒饷庖呓M化檢測(cè)試劑盒（II）	20T
緩沖液	abs952	TBST（10×）	500mL×2
	abs9340	PBST（1×，pH7.4）	500mL
	abs962	PBS緩沖液（1×）	500mL

性能

儲(chǔ)存/保存方法

熒光染料需避光保存，2～8℃儲(chǔ)存，收到貨起有效期為12個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1、本試劑盒只用于免疫組化，不做其他用途。
2、本試劑盒僅限于專(zhuān)業(yè)人員使用。
3、應(yīng)采用適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)措施，以避免試劑同皮膚和眼睛接觸。
4、超過(guò)有效期的試劑活性可能降低，因此不得使用超過(guò)有效期的試劑。
5、若將本試劑盒的染色組分與其他公司的產(chǎn)品混合使用，在染色過(guò)程中可能出現(xiàn)異常情況。
6、脫蠟不徹di，容易影響染色效果。
7、為了防止可能出現(xiàn)的假陰性、假陽(yáng)性結(jié)果，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需有陽(yáng)性對(duì)照及陰性對(duì)照同時(shí)進(jìn)行。
8、使用本試劑盒中所產(chǎn)生的各種廢棄物都應(yīng)按照《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》進(jìn)行處理。

參考文獻(xiàn)

1. Mingzhu Yang, et al., Chemical-induced chromatin remodeling reprograms mouse ESCs to totipotent-like stem cells. Cell Stem Cell. 2022 Mar 3
2. Xin Guan, et al., Nanoparticle-enhanced radiotherapy synergizes with PD-L1 blockade to limit post-surgical cancer recurrence and metastasis. Nature Communication. 2022 May 20
3. Qian-Yue Zhang, et al., Lymphocyte infiltration and thyrocyte destruction are driven by stromal and immune cell components in Hashimoto’s thyroiditis. Nature Communications. 2022 Feb 9
4. Dabbs David J. 診斷免疫組織化學(xué)(M). 北京：北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2008.9.
5. 美】Ed Harlow, David Lane. 抗體技術(shù)指南(M). 北京：科學(xué)出版社，2002:79-80,105.
6. Stack, E. C., et al., Multiplexed immunohistochemistry, imaging, and quantitation: a review, with an assessment of Tyramide signal amplification, multispectral imaging and multiplex analysis. Methods, 2014 70 (1): 46-58.
7. 錢(qián)幫國(guó). 焦磊. 多標(biāo)記免疫熒光染色及多普成像技術(shù)在組織學(xué)研究中的應(yīng)用. 中國(guó)組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志, 2017 (4): 373-382.