無血清細(xì)胞凍存液plus

愛必信的無血清細(xì)胞凍存液采用獨(dú)特配方用于維持細(xì)胞存活的微環(huán)境，該產(chǎn)品成分明確，無血清無蛋白組分，無需程序降溫，可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存，保護(hù)細(xì)胞免受冰晶和溶質(zhì)損傷，可有效提高細(xì)胞復(fù)蘇活率和活力。適用于干細(xì)胞、免疫細(xì)胞等多種細(xì)胞的冷凍保存。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
成分明確，無血清，無動(dòng)物源組分，安全性高。
即取即用，無需配制。
無需程序降溫，一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存。

準(zhǔn)備細(xì)胞：
1、檢查并確認(rèn)細(xì)胞沒有真菌、細(xì)菌、支原體污染。
2、凍存前的細(xì)胞處于增殖旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期最佳。
3、計(jì)數(shù)待凍存的細(xì)胞數(shù)量。懸浮細(xì)胞應(yīng) 180g 離心 5~10min 后除去培養(yǎng)基，貼壁細(xì)胞應(yīng)消化后計(jì)數(shù)，再 180g 離心除去培養(yǎng)基以獲得細(xì)胞沉淀。

細(xì)胞凍存：
1、首先確定細(xì)胞適宜的凍存密度和體積，計(jì)算應(yīng)使用的本凍存液體積。
注意：可使用的凍存密度為 1~10×106 /ml，推薦凍存密度為 2~5×106 /ml。凍存體積為 0.5~1ml/管。
2、吸取適量?jī)龃嬉褐貞壹?xì)胞，使用前產(chǎn)品應(yīng)當(dāng) 2~8℃預(yù)冷。細(xì)胞重懸后應(yīng)當(dāng)立即分裝至細(xì)胞凍存管。
3、經(jīng)凍存液重懸后的細(xì)胞不能在室溫或 2~8℃靜置超過 10 min 以上，應(yīng)當(dāng)盡快將凍存管移入-80℃低溫冰箱，不采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無法立即移入-80℃低溫冰箱，至少應(yīng)當(dāng)先移入低于 0℃環(huán)境中（如-20℃冰箱）短暫存放 10 min 左右，同樣不采取程序降溫。
4、-80℃冰箱過夜后的凍存管，若長(zhǎng)期儲(chǔ)存，可移入液氮罐中保存。若短期取用，可于-80℃短期保存數(shù)月，保存時(shí)間、效果因細(xì)胞類型而不同。
注意：初次使用本產(chǎn)品凍存的細(xì)胞類型，應(yīng)測(cè)試保存時(shí)間和效果后再使用。

細(xì)胞復(fù)蘇：
1、先準(zhǔn)備室溫或 37℃預(yù)溫好的wan全培養(yǎng)基，其體積為凍存液體積的 9 倍。
2、取出液氮或-80℃中的凍存管，置于 37℃水浴并不斷輕搖。待剩余 1 粒米大小的冰塊時(shí)，迅速移出水浴。
3、立即吸取凍存液至wan全培養(yǎng)基中，輕柔吹打 3~5 次混勻。然后，180g 離心 5~10 分鐘，獲得細(xì)胞沉淀備用。
4、加入適量新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩慢懸浮細(xì)胞，并將細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5、24h 后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。

DMSO含量：10%
內(nèi)毒素：< 1 EU/ml