無(wú)DMSO無(wú)血清細(xì)胞凍存液

無(wú)DMSO無(wú)血清細(xì)胞凍存液的有效成分是單一的兩性高分子氨基酸衍生物，不含任何其他冷凍保護(hù)成分，不含DMSO、不含任何人源或動(dòng)物源成分。用于原代肝細(xì)胞，神經(jīng)細(xì)胞凍存細(xì)胞。
產(chǎn)品特色：
無(wú)DMSO，無(wú)血清，無(wú)蛋白，安全性更高。
即取即用，無(wú)需配制。
無(wú)需程序降溫，一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存。

準(zhǔn)備細(xì)胞：
1、檢查并確認(rèn)細(xì)胞沒(méi)有真菌、細(xì)菌、支原體污染。
2、凍存前的細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期最佳。
3、計(jì)數(shù)待凍存的細(xì)胞數(shù)量。懸浮細(xì)胞應(yīng) 180g 離心 5~10min 后除去培養(yǎng)基，貼壁細(xì)胞應(yīng)消化后計(jì)數(shù)，再 180g 離心除去培養(yǎng)基以獲得細(xì)胞沉淀。
細(xì)胞凍存：
1、首先確定細(xì)胞適宜的凍存密度和體積，計(jì)算應(yīng)使用的本凍存液體積。
注意：可使用的凍存密度為 2~40×106 /ml，最佳密度為 4~20×106 /ml。凍存體積為 0.25~1ml/管，推薦凍存體積為 0.5ml/管。
2、吸取適量 凍存液 重懸細(xì)胞，立即分裝至細(xì)胞凍存管。
3、立即將凍存管移入-80℃低溫冰箱，不能采取任何程序降溫措施或使用程序降溫裝置。如果無(wú)法立即移入-80℃低溫冰箱，至少應(yīng)當(dāng)先移入 0℃以下環(huán)境中（如-20℃冰箱）短暫存放 10 min 左右，同樣不能采取程序降溫。凍存液重懸后的細(xì)胞不能在室溫或 2~8℃靜置超過(guò) 10 min 以上。
4、-80℃冰箱過(guò)夜后的凍存管，要立即移入液氮中儲(chǔ)存，不可于-80℃長(zhǎng)期凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇：
1、先準(zhǔn)備室溫或 37℃預(yù)溫的基礎(chǔ)培養(yǎng)基，其體積為凍存液體積的 15~30 倍。
2、取出液氮中的凍存管，置于 37℃水浴并不斷輕搖。待剩余 1 粒米大小的冰塊時(shí)，迅速移出水浴。3、立即用基礎(chǔ)培養(yǎng)基稀釋細(xì)胞懸液，輕柔吹打 3~5 次混勻。然后，180g 離心 5~10 分鐘，獲得細(xì)胞沉淀備用。
4、加入適量新鮮培養(yǎng)基，使用移液管緩慢懸浮細(xì)胞，并將細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞培養(yǎng)皿/瓶中，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
5、24h 后觀察細(xì)胞狀態(tài)，并更換新鮮細(xì)胞培養(yǎng)液。

2-8℃，有效期12個(gè)月。