膠原蛋白I型（鼠尾）

簡要描述：膠原蛋白I型（鼠尾）是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀等步驟制備?？捎糜诎患?xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞，比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實(shí)的生長環(huán)境，使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。

產(chǎn)品型號：abs47014921
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間：2025-11-05
訪問量：2292

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生化試劑

其它生化試劑植物提取物碳水化合物生物緩沖劑熒光探針與染料表面活性劑酶&輔酶&酶底物蛋白質(zhì)組學(xué) 動(dòng)植物激素小分子化合物生化檢測試劑盒逆行示蹤劑抗生素核苷&核苷酸多肽

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詳細(xì)介紹

品牌	absin	CAS	9007-34-5
貨號	abs47014921	規(guī)格	2ml;10ml
供貨周期	現(xiàn)貨	主要用途	可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼
應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合

膠原蛋白I型（鼠尾）

產(chǎn)品描述

描述

膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官細(xì)胞外基質(zhì)的主要構(gòu)造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布最為廣泛。從遺傳和結(jié)構(gòu)上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen, Type I）是由2 個(gè)α1 鏈和1 個(gè)α2 鏈組成的異源多聚體，在37℃，中性pH 下自發(fā)形成三螺旋骨架，是一種優(yōu)秀的細(xì)胞培養(yǎng)用基質(zhì)，廣泛用于肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脊神經(jīng)節(jié)、肌肉細(xì)胞、施萬細(xì)胞、胚肺細(xì)胞、上皮細(xì)胞和其他大量細(xì)胞系。還能用于研究細(xì)胞生長、分化、遷移以及發(fā)育過程中的組織形態(tài)發(fā)生。

鼠尾膠原蛋白I 是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二na沉淀等步驟制備?？捎糜诎患?xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞，比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實(shí)的生長環(huán)境，使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長。

本品為溶于6mM HAc 的無菌溶液，濃度5mg/ml，每個(gè)批次產(chǎn)品皆通過細(xì)胞培養(yǎng)測試（包括三維空間培養(yǎng)）以保證質(zhì)量的可靠性。

濃度

5mg/mL

使用方法

一、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被：
組織培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度為1-5μg/cm2，起始濃度可shou選5μg/cm2。建議根據(jù)具體細(xì)胞類型來優(yōu)化。
1、6mM HAc 稀釋液的制備
本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的無菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建議用6mM HAc 溶液做進(jìn)一步稀釋。
配制方法：取34.5μL 冰醋酸（17.4 M）加入100ml 雙蒸水，充分混勻后即得到6mM HAc 溶液，0.22μm 濾膜過濾除菌后待用。
2、包被步驟
（1）根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系以及優(yōu)化后的包被濃度來計(jì)算所需的膠原蛋白量，并加入相應(yīng)孔內(nèi)，確保膠原蛋白溶液wan全覆蓋表面。
①以包被濃度為5μg/cm2，先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白（5mg/mL）稀釋到合適的中間濃度，50μg/mL，然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表來加量到各孔內(nèi)；
②以包被濃度為2μg/cm2，先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白（5mg/mL）稀釋到合適的中間濃度，12μg/mL，然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表來加量到各孔內(nèi)；
表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表

培養(yǎng)皿類型	每孔/皿表面積（cm2）	當(dāng)包被濃度：2μg/cm2，中間稀釋濃度：12μg/mL，加入該稀釋液的體積（μL）	當(dāng)包被濃度：5μg/cm2，中間稀釋濃度50μg/mL，加入該稀釋液的體積（μL）
96 well	0.3	50	30
24 well	1.9	300	190
12 well	3.8	600	380
6 well	9.5	1580	950
35mm	8	1330	800
60mm	21	3500	2100
100mm	55	9170	5500

（2）室溫孵育1h，小心吸掉多余液體，用無菌PBS 清洗3~4 次后直接使用?；蛘呒油昴z原蛋白溶液后，在超凈臺(tái)內(nèi)開蓋過夜晾干。無菌條件下，包被好的器皿在4-25℃至少可保存3 個(gè)月。
二、三維膠原的制備：
當(dāng)鼠尾膠原蛋白I 使用濃度>1mg/mL，pH 7.0 左右皆可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，建議成膠濃度為1-2mg/mL。
由于本品是以溶于6mM HAc 的無菌溶液形式提供，在成膠過程需先加入0.06 倍體積的0.1M NaOH 中和。
1、需要溶液準(zhǔn)備（無菌、預(yù)冷）
10×PBS（可含酚紅）或10×細(xì)胞培養(yǎng)液
0.1M NaOH
雙蒸水
2、三維膠原制備（不含細(xì)胞）（以配制1mL，1mg/mL 三維膠為例）：
（1）取200μL 膠原蛋白（5mg/mL）加到置于冰浴的離心管內(nèi)，加入690μL 無菌水。之后加到12μL 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μL 0.1M NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】，立即混勻。再加入100μL 10×PBS 或10×細(xì)胞培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中【注意：混勻后pH 為7.0 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH 試紙測試】
（2）將培養(yǎng)器皿在室溫（25℃左右）放置20min 待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)?！咀⒁狻浚喝绻渲浦惺褂玫氖?0×PBS，需要在做細(xì)胞培養(yǎng)前，先加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。
3、三維膠原制備（含細(xì)胞）（以配制1mL，1mg/mL 三維膠為例）：
（1）準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液，并放置于冰浴中。
（2）將200μL 膠原蛋白（5mg/mL）加到12μL 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μL0.1M NaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】，立即混勻。再加入23μL 10×PBS
或者10×細(xì)胞培養(yǎng)液，立即混勻【注意：混勻后pH 為7.0 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測試】。再加入760μL 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。
（3）將培養(yǎng)器皿在室溫（25℃左右）放置20min 待膠凝固后，加入適當(dāng)體積細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

儲(chǔ)存/保存方法

2-8℃保存，不可凍存，有效期12個(gè)月。

注意事項(xiàng)

1、整個(gè)操作請于冰上進(jìn)行，因室溫鼠尾膠原I 可迅速成膠，操作過程盡量保持低溫。
2、整個(gè)操作請?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細(xì)胞生長。
3、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

基本信息

外觀

溶液

膠原蛋白I型（鼠尾）溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究

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