核酸轉(zhuǎn)染試劑盒

簡(jiǎn)要描述：核酸轉(zhuǎn)染試劑盒可高效轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)90%以上（Hela細(xì)胞，EGFP質(zhì)粒）。試劑A功能強(qiáng)大，不僅可高效轉(zhuǎn)染較大分子的質(zhì)粒DNA，還可高效轉(zhuǎn)染mRNA、siRNA、mimics和各種小分子DNA。

產(chǎn)品型號(hào)：abs60259
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時(shí)間：2025-11-19
訪問量：2454

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產(chǎn)品分類

Product Category

生化試劑

其它生化試劑植物提取物碳水化合物生物緩沖劑熒光探針與染料表面活性劑酶&輔酶&酶底物蛋白質(zhì)組學(xué) 動(dòng)植物激素小分子化合物生化檢測(cè)試劑盒逆行示蹤劑抗生素核苷&核苷酸多肽

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詳細(xì)介紹

品牌	absin	CAS	-
分子式	-	純度	-
分子量	-	貨號(hào)	abs60259
規(guī)格	0.5ml；1.0ml；1.5ml	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	專門用于核酸高效轉(zhuǎn)染的試劑盒	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合

產(chǎn)品描述

描述

產(chǎn)品介紹：
該產(chǎn)品是我司在Plasmid Transfection Reagent的基礎(chǔ)上進(jìn)一步研發(fā)成功的專門用于核酸高效轉(zhuǎn)染的試劑盒。它具有非常zhuo越的轉(zhuǎn)染性能，可高效轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)90%以上（Hela細(xì)胞，EGFP質(zhì)粒）。其功能強(qiáng)大，不僅可高效轉(zhuǎn)染較大分子的質(zhì)粒DNA，還可高效轉(zhuǎn)染mRNA、siRNA、mimics和各種小分子DNA。與目前市場(chǎng)上常見的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑不同，該試劑盒采用生物可降解材料配制，對(duì)細(xì)胞的毒性很低，轉(zhuǎn)染后24小時(shí)細(xì)胞幾乎無(wú)明顯死亡。它使用也非常方便，先將轉(zhuǎn)染試劑與質(zhì)粒DNA混合，再將轉(zhuǎn)染試劑-DNA復(fù)合物直接加入培養(yǎng)細(xì)胞中，血清不影響其轉(zhuǎn)染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液，操作十分簡(jiǎn)便。它適合于貼壁細(xì)胞的核酸轉(zhuǎn)染，如需轉(zhuǎn)染原代細(xì)胞，請(qǐng)選擇原代細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒（abs60324）。如需轉(zhuǎn)染懸浮細(xì)胞，請(qǐng)選擇懸浮細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒（abs60325）。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、zhuo越的細(xì)胞轉(zhuǎn)染性能：可高效轉(zhuǎn)染多種貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率在貼壁細(xì)胞中可高達(dá)90%以上；
2、轉(zhuǎn)染功能強(qiáng)大，不僅可高效轉(zhuǎn)染大分子質(zhì)粒DNA，還可高效轉(zhuǎn)染mRNA、siRNA、mimics和各種小分子DNA；
3、極低的細(xì)胞毒性：使用可降解生物材料，細(xì)胞毒性低，轉(zhuǎn)染細(xì)胞死亡率不到10%，大大降低了因細(xì)胞毒性對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響；
4、操作簡(jiǎn)便，可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染，轉(zhuǎn)染前后不需要更換培養(yǎng)液。

試劑盒組分

貨號(hào)	試劑A	試劑B	Trans buffer S
abs60259-0.5mL	0.4 mL	0.5 mL	15 mL
abs60259-1.0mL	0.8 mL	1.0 mL	30 mL
abs60259-1.5mL	1.2 mL	1.5 mL	45 mL

使用方法

操作步驟：

一、質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）:

A、細(xì)胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前一天對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接，每孔接種0.8-1.2×105個(gè)細(xì)胞，使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為90%左右，且生長(zhǎng)良好（非常重要）；
2、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大、營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
B、試劑B /DNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備(該步完成后應(yīng)立即進(jìn)行轉(zhuǎn)染):
1、在1.5 mL無(wú)菌離心管中加入30 uL Trans buffer S，再加入適量的轉(zhuǎn)染試劑，見附表。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 mL無(wú)菌離心管中加入30 uL Trans buffer S，并加入適量的試劑A，輕輕混勻，再加入適量的DNA，見附表。用移液器再次輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將DNA-Trans buffer S混合物滴加至試劑B-Trans buffer S混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15分鐘，立即轉(zhuǎn)染。注意：試劑B-Trans buffer S混合物和DNA-Trans buffer S混合物的混合次序非常重要，切勿顛倒。
注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。
C、轉(zhuǎn)染:
1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中，邊加邊輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板以使復(fù)合物均勻分布。加完后，立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、培養(yǎng)12小時(shí)后即可觀察，最佳觀察或收獲時(shí)間為24-48小時(shí)。
3、試劑B在wan全培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基。

二、siRNA轉(zhuǎn)染（以24孔板轉(zhuǎn)染為例）:

A、細(xì)胞接種:
1、轉(zhuǎn)染前一天對(duì)細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)接，使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度為30-50%左右，且生長(zhǎng)良好、無(wú)支原體污染（非常重要）；
2、最好在轉(zhuǎn)染開始之前更換新鮮的含血清培養(yǎng)基，以防轉(zhuǎn)染后孵育階段細(xì)胞密度太大、營(yíng)養(yǎng)不足導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
B、試劑B /siRNA轉(zhuǎn)染復(fù)合物制備 (該步完成后應(yīng)立即轉(zhuǎn)染):
1、在1.5 mL無(wú)菌離心管中加入30 uL Trans buffer S，并添加適量的轉(zhuǎn)染試劑(見下表) 。用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
2、在1.5 mL無(wú)菌離心管中加入30 uL Trans buffer S，并添加適量的siRNA（見下表），用移液器輕輕混勻后在室溫靜置5分鐘。
3、將siRNA-Trans buffer S混合物滴加至試劑B-Trans buffer S混合物中，用移液器輕輕混勻后在室溫靜置15分鐘后，立即轉(zhuǎn)染。
C、轉(zhuǎn)染:
1、將步驟B制備的轉(zhuǎn)染復(fù)合物滴加至培養(yǎng)基中，邊加邊輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)板。加完后，立即將培養(yǎng)板轉(zhuǎn)入培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
2、37°C培養(yǎng)24-72小時(shí)，檢測(cè)基因抑制效果。如果需要，細(xì)胞培養(yǎng)4-6小時(shí)可以更換培養(yǎng)基，但不是必須。
3、試劑B 在wan全培養(yǎng)基中仍有較高的轉(zhuǎn)染效率，因此轉(zhuǎn)染前后不需要換成無(wú)血清或低血清培養(yǎng)基。

儲(chǔ)存/保存方法

-20°C 保存，使用前請(qǐng)輕輕混勻；有效期1年。

技術(shù)指標(biāo)

附表 1：質(zhì)粒轉(zhuǎn)染不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件

培養(yǎng)皿		96 孔板	48 孔板	24 孔板	12 孔板	6 孔板	10cm 皿
培養(yǎng)基、試劑、DNA量	Trans buffer S (uL)	2x6	2x15	2x30	2x60	2x120	2x600
	試劑A (uL)	0.4	1.0	2.0	4.0	8.0	40
	試劑B (uL)	0.5	1.3	2.5	5.0	10	50
	1 ug/uL plasmid (uL)	0.16	0.4	0.8	1.6	3.2	16
wan全培養(yǎng)基(mL)		0.10	0.25	0.50	1.0	2.0	10

附表 2：siRNA 轉(zhuǎn)染不同培養(yǎng)體系推薦初始轉(zhuǎn)染條件

培養(yǎng)皿		96 孔板	48 孔板	24 孔板	12 孔板	6 孔板	10cm 皿
培養(yǎng)基、試劑、DNA量	Trans buffer S (uL)	2x6	2x15	2x30	2x60	2x120	2x600
	試劑B(uL)	0.4	1.0	2.0	4.0	8.0	40
	siRNA (pmol)	4	10	20	40	80	400
wan全培養(yǎng)基(mL)		0.10	0.25	0.50	1.0	2.0	10

產(chǎn)品用途

可高效轉(zhuǎn)染絕大多數(shù)貼壁細(xì)胞，轉(zhuǎn)染效率可高達(dá)90%以上（Hela細(xì)胞，EGFP質(zhì)粒）。試劑A功能強(qiáng)大，不僅可高效轉(zhuǎn)染較大分子的質(zhì)粒DNA，還可高效轉(zhuǎn)染mRNA、siRNA、mimics和各種小分子DNA。

注意事項(xiàng)

1、shou次轉(zhuǎn)染，請(qǐng)務(wù)必進(jìn)行優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，如24孔板質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，每孔質(zhì)粒用量0.8 ug，試劑B 可選擇2.0 uL、2.5 uL、3.0 uL、3.5 uL進(jìn)行優(yōu)化。24孔板siRNA轉(zhuǎn)染，試劑B 用量2.0 uL，siRNA用量可選10 pmol、20 pmol、30 pmol、40 pmol進(jìn)行優(yōu)化。
2、進(jìn)行質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，接種細(xì)胞的數(shù)量應(yīng)以確保轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞匯合度在80-90%為準(zhǔn)，過(guò)高或過(guò)低均會(huì)影響轉(zhuǎn)染效率。進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染，接種細(xì)胞的數(shù)量應(yīng)以確保轉(zhuǎn)染時(shí)的細(xì)胞匯合度在30-50%為準(zhǔn)。
3、試劑A僅用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，RNA或siRNA轉(zhuǎn)染不需加入試劑A。
4、請(qǐng)注意質(zhì)粒轉(zhuǎn)染和siRNA轉(zhuǎn)染時(shí)對(duì)細(xì)胞密度和轉(zhuǎn)染試劑用量等條件的差異，不要混用同一條件。
5、如果需要質(zhì)粒穩(wěn)轉(zhuǎn)，請(qǐng)?jiān)谵D(zhuǎn)染24-48小時(shí)后加入篩選培養(yǎng)基。
6、本產(chǎn)品適合于質(zhì)粒DNA、siRNA分別獨(dú)立轉(zhuǎn)染，如需質(zhì)粒DNA、siRNA共轉(zhuǎn)，請(qǐng)選用核酸共轉(zhuǎn)染試劑盒。
本產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究，不得用于醫(yī)學(xué)臨床用途。

溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究

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