上期給大家介紹了分子克隆的概念、原理以及通用實(shí)驗(yàn)流程，相信大家已經(jīng)對(duì)分子克隆技術(shù)應(yīng)該有一定了解了，詳見“分子克隆技術(shù)全攻略”。本期小愛將為大家講解分子克隆的載體——質(zhì)粒。走！瞅瞅去!分子克隆技術(shù)運(yùn)用的載體只要是指將DNA片段（目的基因）轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的一種能自我復(fù)制的DNA分子工具。常見的載體主要有質(zhì)粒、噬菌體、病毒等。今天咱們要聊的主角是質(zhì)粒。一、什么是質(zhì)粒？天然質(zhì)粒是可獨(dú)立于染色體外可自行復(fù)制的環(huán)狀DNA分子，通常帶有一些基因，特別是一些與抗生素耐藥性有關(guān)的基因，可以在不...

組織解離液是一種用于分離器官、組織和細(xì)胞的化學(xué)物質(zhì)，它可以將細(xì)胞膜破壞，從而使細(xì)胞失去結(jié)構(gòu)和功能，最終達(dá)到解離細(xì)胞的作用。組織解離液可用于細(xì)胞培養(yǎng)、體外研究、細(xì)胞分離、生物工程等領(lǐng)域。作用原理：組織解離液的作用原理是通過破壞細(xì)胞膜來破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞表面上的黏附分子失去功能，從而解離細(xì)胞。解離液中往往含有蛋白水解酶、膽固醇酯酶或者其他化學(xué)試劑，這些試劑分解膠原等細(xì)胞外基質(zhì)分子，省去了手工分離所需的時(shí)間和人力成本。特點(diǎn)：1.解離液豐富多樣，種類繁多，可以根據(jù)不同需要來調(diào)配。2...

奶牛的乳腺分支形態(tài)發(fā)育是完成泌乳功能的基本條件。乳腺分支結(jié)構(gòu)可以通過提高乳腺腺泡組織的數(shù)量和分泌功能來提高奶牛乳產(chǎn)量。3D培養(yǎng)可以在體外誘導(dǎo)組織器官分支形態(tài)的發(fā)生，已經(jīng)是研究乳腺分支形態(tài)普遍使用的方法。類器官(Organoids)是器官特異性細(xì)胞類型的3D細(xì)胞集合，這些細(xì)胞從干細(xì)胞或器官祖細(xì)胞發(fā)育而來，并能以與體內(nèi)相似的方式經(jīng)細(xì)胞分序(cellsortingout)和空間限制性的系別分化而實(shí)現(xiàn)自我組建。圖1奶牛乳腺類器官明場圖展示一、產(chǎn)品信息貨號(hào)品名規(guī)格abs9591Orga...

圖1近日天津醫(yī)科大學(xué)又一力作發(fā)表于化學(xué)工程雜志（ChemicalEngineeringJournal）IF：16.74Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）是內(nèi)在凋亡途徑的一個(gè)研究靶點(diǎn)，它可以增強(qiáng)TNF相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）、Fas相關(guān)死亡域蛋白（FADD）、p53和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)（ER）信號(hào)通路，在維持組織穩(wěn)態(tài)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。已經(jīng)證明，BAX的下調(diào)和突變在不同的疾病發(fā)展中被觀察到，如腫瘤的起始、復(fù)發(fā)和化療耐藥性、致命的自身免疫性疾病和一些發(fā)育缺陷。因此，調(diào)節(jié)BAX的活性在機(jī)制研究和...

293[HEK-293]細(xì)胞是經(jīng)人腺病毒5(Ad5)轉(zhuǎn)染而形成的人胚腎細(xì)胞永生化細(xì)胞系，293細(xì)胞包含并表達(dá)轉(zhuǎn)染的Ad5基因。293T細(xì)胞是293[HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株，廣泛用于病毒包裝，呈上皮樣，貼壁，營養(yǎng)體系是DMEM+10%FBS。表1293T細(xì)胞基本信息名稱293T[HEK-293T]（人胚腎細(xì)胞）形態(tài)上皮樣生長特性貼壁營養(yǎng)體系DMEM（abs9483）+10%FBS（abs972）+1%雙抗（abs94...

百日咳毒素（PertussisToxin，PTX）是鮑特氏菌屬百日咳桿菌所產(chǎn)生的一種主要毒力因子，具有多種生物學(xué)活性，能引起百日咳眾多的臨床癥狀，同時(shí)也是主要的免疫原。與大多數(shù)哺乳動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞結(jié)合并特定靶向G蛋白，抑制G蛋白及其在信號(hào)通路中的生理功能。正是依賴Gi家族的蛋白偶聯(lián)受體來抑制信號(hào)通路的能力，使得PTX成為細(xì)胞生物學(xué)研究中的一種重要工具。圖1用Gαi抑制劑PTX(50ng/ml)和Gαq抑制劑FR900359(1μM)預(yù)處理對(duì)HEK293T細(xì)胞中QRFP26(1μM...

首先我們需要先回顧下3’端polyA尾的功能：保護(hù)帽結(jié)構(gòu)不被降解，與polyA結(jié)合蛋白、5’Cap（帽結(jié)構(gòu)）和翻譯起始因子蛋白協(xié)同作用，啟動(dòng)蛋白質(zhì)的翻譯。多數(shù)mRNA的polyA長度為50–200nt，以維持正常的生物學(xué)功能。polyA尾的有無與長度是mRNA藥物的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一。當(dāng)前polyA尾的檢測分為兩種思路：①與加帽率的分析策略類似，酶切后純化回收3’端polyA尾，隨后通過毛細(xì)管電泳（CE）、變性聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）、高效液相色譜（HPLC）或液相色譜質(zhì)...

細(xì)胞培養(yǎng)后，需要對(duì)其生長情況、形態(tài)甚至生物學(xué)性狀進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而復(fù)雜，若不借助適當(dāng)?shù)氖侄危y以觀察其形態(tài)、結(jié)構(gòu)，更難發(fā)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)各種組分的分子組成及功能。目前，已有多種研究細(xì)胞的技術(shù)，從光學(xué)顯微鏡到電子顯微鏡，從一般細(xì)胞化學(xué)法到免疫化學(xué)法。細(xì)胞染色是研究細(xì)胞生物學(xué)特征的一種常用手段，然而，對(duì)于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)新手來說，想要獲得一張漂亮的細(xì)胞染色圖并不容易。染色試劑不會(huì)選、細(xì)胞染色不均勻、染色時(shí)切片脫落等都是很常見的問題。今天小愛就為大家整理了幾種常用細(xì)胞染色方法及染色劑選擇指南，...