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    Article技術(shù)文章
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    • PMA(TPA)佛波酯是一種廣泛用于體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)的佛波酯(phorbolester)PKC激活劑。PMA結(jié)合PKC(Ki=2.6nM)并激活其功能,在細(xì)胞和組織中都呈現(xiàn)出極其廣的抑制譜。PMA可以抑制Fas誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡,但又可以誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞的凋亡。PMA是一種高效的腫瘤促進(jìn)劑,可以促進(jìn)小鼠皮膚瘤的形成。盡管PMA毒性較強(qiáng),但是在人體內(nèi)仍顯示出抗白血病和抗中性白細(xì)胞減少的活性。圖一.PMA結(jié)構(gòu)圖體外研究:為了檢查PKC在p38MAPK磷酸化中的作用,用PKC活化劑PMA(...

      2020-08-17
    • 一、免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP),是以(抗體和抗原)之間的專(zhuān)一性作用為基礎(chǔ)的用于研究(蛋白質(zhì)相互作用)的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整(細(xì)胞內(nèi)生理性)相互作用的有效方法。如果用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X,那么與X在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能沉淀下來(lái)。區(qū)別于IP實(shí)驗(yàn),CO-IP與IP只取決于檢測(cè)焦點(diǎn)是初級(jí)靶分子(抗原)還是次級(jí)靶分子(相互作用蛋白)二、實(shí)驗(yàn)過(guò)程1、提取蛋白。2、在細(xì)胞裂解液中加入抗X的抗體。3、孵育后再加入Pr...

      2020-08-13
    • ELISA試劑盒變質(zhì)是ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常見(jiàn)的問(wèn)題,那么,ELISA試劑盒變質(zhì)是因?yàn)槭裁茨??是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦變質(zhì)會(huì)有什么影響呢?一、方法學(xué)的影響ELISA測(cè)定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競(jìng)爭(zhēng)抑制法,其中競(jìng)爭(zhēng)抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不gong平競(jìng)爭(zhēng)等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。二、試劑因素不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)...

      2020-07-25
    • Elisa實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問(wèn)題,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問(wèn)題.Elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),深受廣大用戶朋友的喜愛(ài).然而,在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,也需要注意很多問(wèn)題.Elisa方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定.在Elisa測(cè)定中影響因素較多,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果.引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:標(biāo)本因素;試劑因素;操作因素.1.樣品稀釋一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過(guò)大量試驗(yàn)確定,以保證試...

      2020-07-23
    • 【DNA甲基化】DNA甲基化是指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MTase)催化下,在DNA腺嘌呤或胞嘧啶堿基上加一個(gè)甲基,是細(xì)菌復(fù)制后DNA修飾機(jī)制中研究多的一種。迄今為止發(fā)現(xiàn)的三種核苷酸甲基化形式是:N6甲基腺嘌呤(m6A)、N4甲基胞嘧啶(m4C)和5-甲基胞嘧啶(m5C)。DNA甲基化是一種表觀遺傳修飾,抑制基因表達(dá)。DNA甲基化主要由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶家族(DNMTs)引起,包括DNMT1、DNMT3a和DNMT3b。傳統(tǒng)上,DNMT1作為主要的維持甲基轉(zhuǎn)移酶來(lái)保持基因組中已建立...

      2020-07-22
    • 細(xì)胞培養(yǎng)/凋亡時(shí),需要對(duì)其生長(zhǎng)和活性情況進(jìn)行觀察。由于細(xì)胞小而透明常采用細(xì)胞染色的方法觀察!今天小編整理了下常用染色方法,供大家參考!Hoechst染色:Hoechst可以穿過(guò)活細(xì)胞膜與細(xì)胞核結(jié)合(主要為凋亡活細(xì)胞)在紫外光下將核染色為藍(lán)色。IP(碘化丙啶)染色:是一種可對(duì)DNA染色的細(xì)胞核染色試劑,常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)。碘化丙啶是一種核酸染料呈紅色,它不能透過(guò)完整的細(xì)胞膜,但凋亡中晚期的細(xì)胞和壞死細(xì)胞由于細(xì)胞通透性的增加,PI能夠透過(guò)細(xì)胞膜而使細(xì)胞核染紅,用PI單一染色觀測(cè)培...

      2020-07-21
    • 疫情相關(guān)因子ELISA檢測(cè)試劑盒:貨號(hào)品名規(guī)格用途abs510006HumanTNF-αELISAKit96T細(xì)胞因子風(fēng)暴常見(jiàn)指標(biāo)檢測(cè)試劑盒abs510002HumanIL-1betaELISAkit96T細(xì)胞因子風(fēng)暴常見(jiàn)指標(biāo)檢測(cè)試劑盒abs510003HumanIL-6ELISAKit96T細(xì)胞因子風(fēng)暴常見(jiàn)指標(biāo)檢測(cè)試劑盒abs510011HumanIL-12/IL-23p40ELISAKit96T細(xì)胞因子風(fēng)暴常見(jiàn)指標(biāo)檢測(cè)試劑盒abs510007HumanIFN-gammaE...

      2020-07-03
    • 牛血清白蛋白,英文名稱(chēng)BovineSerumAlbumin(BSA),也稱(chēng)CohnFractionV,即第五組分(第五組分并不是BSA的一種組份,而是EdwinJ.Cohn教授早期從血液中通過(guò)特定的分離技術(shù)得到5種組份,其中第五種就是白蛋白)。BSA作為牛血清中的一種白蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.43kDa,等電點(diǎn)為4.7。BSA有著極其廣泛的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用,除在細(xì)胞培養(yǎng)中作為營(yíng)養(yǎng)物添加外,BSA主要還有以下用途:1.在酶切反應(yīng)體系中作穩(wěn)定劑,對(duì)酶起保護(hù)作用,并防...

      2020-07-02
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