實(shí)驗(yàn)室里,一小塊肝組織在透明液體的作用下,30分鐘內(nèi)分散成數(shù)以萬計(jì)的活性細(xì)胞,等待科研人員探索生命奧秘。
在細(xì)胞生物學(xué)研究中,組織解離液作為一種由多種生物酶組成的混合物,正成為實(shí)驗(yàn)室重要的工具。它能夠溫和、快速、高效地將組織中的結(jié)締組織酶解并釋放出細(xì)胞,形成細(xì)胞懸液。
無論是大腦、心臟、脾臟、肝臟、腎臟、胰腺、腸胃、膽囊,還是各類腫瘤組織,這種多功能的解離液都能應(yīng)對自如,為后續(xù)研究提供高活性的細(xì)胞樣本。
組織解離液的核心技術(shù)在于其多種生物酶的科學(xué)配比。不同于傳統(tǒng)的單一酶消化法,這種混合物能同時(shí)靶向組織細(xì)胞外基質(zhì)中的不同成分。
膠原酶、分散酶、彈性蛋白酶和透明質(zhì)酸酶等協(xié)同作用,就像一支配合默契的團(tuán)隊(duì),分別負(fù)責(zé)分解膠原蛋白、纖維連接素、彈性蛋白和透明質(zhì)酸,從而溫和地解除細(xì)胞間的連接。
這種多酶協(xié)同系統(tǒng)避免了單一酶消化不che底或?qū)?xì)胞損傷大的問題,確保在較短時(shí)間內(nèi)獲得大量高活性的完整細(xì)胞,同時(shí)保留重要的細(xì)胞表面抗原。

Absin 組織解離液(#abs9482)
組織解離液的應(yīng)用領(lǐng)域極為廣泛,幾乎覆蓋了所有常見的實(shí)驗(yàn)組織類型。
在常規(guī)組織處理方面,它適用于脾臟、肝臟、腎臟、胰腺等多種人源和動(dòng)物源組織。
特別值得關(guān)注的是,對于結(jié)構(gòu)復(fù)雜的腫瘤組織,組織解離液同樣表現(xiàn)出色。腫瘤組織通常含有豐富的細(xì)胞外基質(zhì),結(jié)構(gòu)緊密,傳統(tǒng)方法難以獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液,而專門設(shè)計(jì)的組織解離液能夠有效解決這一難題。
組織解離液獲取的細(xì)胞具有高活力特性,使其成為原代細(xì)胞培養(yǎng)的理想起始材料。原代細(xì)胞保留著體內(nèi)生理特性,比細(xì)胞系更能代表體內(nèi)真實(shí)情況。
在細(xì)胞分選領(lǐng)域,解離液保存細(xì)胞表面抗原的特點(diǎn),確保了免疫細(xì)胞化學(xué)染色或流式細(xì)胞術(shù)分選的準(zhǔn)確性,為免疫學(xué)研究提供了可靠基礎(chǔ)。
在單細(xì)胞測序技術(shù)中,高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。組織解離液提供的細(xì)胞活性和完整性,保障了后續(xù)測序數(shù)據(jù)的可靠性。
在藥物篩選領(lǐng)域,通過解離液獲得的原代細(xì)胞對藥物反應(yīng)更接近體內(nèi)真實(shí)情況,大大提高了篩選結(jié)果的臨床預(yù)測價(jià)值。
類器官構(gòu)建是近年來的研究熱點(diǎn),組織解離液為這一領(lǐng)域提供了基礎(chǔ)——將組織消化成適合3D培養(yǎng)的細(xì)胞團(tuán)塊或單細(xì)胞。
試劑:組織解離液、細(xì)胞培養(yǎng)基、紅細(xì)胞裂解液(可選)
耗材:離心管、一次性無菌過濾器(70μm)
器械:眼科剪、眼科鑷
儀器:恒溫?fù)u床、離心機(jī)
組織預(yù)處理:取約100mg新鮮組織至無菌離心管中,用眼科剪將組織che底剪碎至1-2mm3小塊。
解離反應(yīng):加入1mL組織解離液,將離心管置于恒溫?fù)u床上,37℃、180rpm震蕩孵育。不同組織消化時(shí)間有所不同(10-60分鐘),需根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整。
細(xì)胞收集:孵育結(jié)束后,將組織勻漿用70μm無菌過濾器過濾,用細(xì)胞培養(yǎng)基沖洗過濾器,收集濾液。
細(xì)胞清洗:將細(xì)胞懸液1200rpm離心5分鐘,棄上清;重復(fù)清洗一次。
細(xì)胞重懸:用細(xì)胞培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,取少量觀察消化情況。
組織解離液的典型技術(shù)參數(shù)如下:
| 參數(shù)類別 | 具體指標(biāo) | 參考值 |
|---|---|---|
| 適用組織范圍 | 人源/動(dòng)物源組織 | 腦、心、脾、肝、腎、胰、腫瘤等 |
| 保存條件 | 溫度/時(shí)間 | -20℃密封保存,有效期6個(gè)月 |
| 使用條件 | 溫度/pH/時(shí)間 | 37℃,生理pH,10-60分鐘 |
| 細(xì)胞得率 | 活性/抗原保存 | 高活性,保留表面抗原 |
組織新鮮度是成功解離的首要因素。盡可能使用新鮮采集的組織樣本,若需短暫保存,應(yīng)置于預(yù)冷的無菌PBS中。
組織剪碎程度直接影響解離效率。組織塊越小,與解離液的接觸面積越大,消化效果越好。理想大小為1-2mm3,需使用鋒利的眼科剪刀操作。
解離液用量需適中,通常1mL解離液處理100mg組織。過量會(huì)增加成本且可能對細(xì)胞造成機(jī)械損傷,不足則導(dǎo)致解離不che底。
溫度控制至關(guān)重要。酶反應(yīng)在37℃時(shí)效率較高,因此推薦在恒溫?fù)u床中進(jìn)行解離。
無菌操作是保證后續(xù)細(xì)胞培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。若細(xì)胞將用于培養(yǎng),所有步驟都應(yīng)在生物安全柜或超凈工作臺(tái)中完成。
除了常規(guī)的組織解離液,市場上還存在其他組織解離方法,各有特點(diǎn):
傳統(tǒng)酶消化法(如膠原酶、胰蛋白酶):價(jià)格較低,但需要根據(jù)不同組織類型調(diào)整酶配方,操作復(fù)雜,效果不穩(wěn)定。
自動(dòng)化組織解離儀:可一次處理8個(gè)樣品,自動(dòng)化程度高,結(jié)果一致性好,但設(shè)備投資較大。
通用型組織解離液:兼顧了經(jīng)濟(jì)性和便利性,適合處理多種組織類型,無需頻繁更換試劑,特別適合多組織類型的研究實(shí)驗(yàn)室。
隨著單細(xì)胞測序、類器官培養(yǎng)等前沿技術(shù)的蓬勃發(fā)展,組織解離液的價(jià)值愈發(fā)凸顯。它不再僅僅是實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備的一個(gè)步驟,而是連接宏觀組織與微觀細(xì)胞世界的重要橋梁。
未來,隨著組織解離技術(shù)的進(jìn)一步精細(xì)化與標(biāo)準(zhǔn)化,我們有理由相信,更多生命的奧秘將通過這支小小的解離液被一一揭開。
無論你是細(xì)胞生物學(xué)的新手還是zi深研究者,掌握組織解離液的使用,都意味著你掌握了開啟細(xì)胞大門的鑰匙。
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
|---|---|---|
| abs9482 | 組織解離液 | 10mL/10mL×5 |
好消息!Absin文獻(xiàn)獎(jiǎng)勵(lì)重磅升級(jí)!
Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)...
特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...
