單細胞+空間轉(zhuǎn)錄組揭秘PTMC進展關鍵軸，Absin多色試劑盒賦能蛋白定位研究

一、研究背景：PTMC 臨床痛點亟待機制突破

甲狀腺乳頭狀癌（PTC）發(fā)病率逐年上升，其中甲狀腺微小乳頭狀癌（PTMC，直徑≤1cm）占比超 50%。盡管多數(shù) PTMC 生長緩慢、預后良好（10 年生存率 93.5%-97%），但仍有 0.4%-28.8% 的病例會出現(xiàn)快速進展（如腫瘤增大、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、甲狀腺外侵犯），而臨床缺乏精準識別進展風險的標志物與干預靶點。

此外，2013 年 “PTMC 過度診斷與過度治療" 概念提出后，日本、美國等國推廣 “主動監(jiān)測（AS）" 替代手術，但如何區(qū)分 “惰性 PTMC" 與 “進展性 PTMC" 仍是臨床難題 —— 這也正是本研究的核心目標：挖掘 PTMC 進展的關鍵分子機制與潛在標志物。

二、核心研究思路：從 “細胞生態(tài)" 到 “通路機制" 的系統(tǒng)解析

研究團隊采用 “多維度測序 + 多水平驗證" 的邏輯鏈，層層遞進揭示 PTMC 進展機制，具體思路如下：

1. 樣本設計：覆蓋疾病全階段，確保數(shù)據(jù)代表性

選取 19 例手術標本（來自 15 例患者），涵蓋 4 類關鍵組別：

• 正常甲狀腺組織（4 例）

• 非進展 PTMC（4 例，經(jīng) 5 年 AS 無進展）

• 進展 PTMC（5 例，出現(xiàn)腫瘤增大 / 轉(zhuǎn)移）

• 進展性 PTC（6 例，晚期病例）

2. 技術路線：“測序解析→空間定位→功能驗證" 三步走

1. 單細胞層面：通過 scRNA-seq 對 146,529 個細胞進行測序，劃分 32 個細胞簇，明確甲狀腺癌細胞、成纖維細胞、免疫細胞等 6 大類細胞的動態(tài)變化；

2. 空間層面：結(jié)合 10x Visium 空間轉(zhuǎn)錄組，定位不同細胞群在組織中的分布，解析進展期腫瘤的異質(zhì)性；

3. 通訊層面：用 CellChat 分析細胞間配體 - 受體互作，鎖定 PROS1-MERTK 軸為關鍵通路；

4. 蛋白驗證層面：使用 Absin 多重 IHC/IF 試劑盒（abs50014）檢測靶蛋白表達與共定位，驗證通路的細胞來源；

5. 功能驗證層面：通過細胞遷移 / 侵襲實驗、小鼠皮下移植瘤模型，證實 PROS1-MERTK 軸的促進展作用；

6. 機制深挖層面：用 SCENIC 分析、雙熒光素酶報告實驗，找到調(diào)控 PROS1 的轉(zhuǎn)錄因子（NFYB/FOXP2）及下游通路（WNT/TGF-β）。

三、關鍵研究成果：PROS1-MERTK 軸成 PTMC 進展 “加速器"

研究團隊通過系統(tǒng)分析，得出 4 項核心結(jié)論，每一項均有扎實的數(shù)據(jù)支撐：

1. PTC 進展伴隨微環(huán)境 “免疫抑制 + 成纖維細胞富集"

scRNA-seq 結(jié)果：

• 隨疾病進展（正?！鶬 期→II 期→III 期），T/NK 細胞比例逐漸下降（免疫抑制增強）；

• 成纖維細胞比例顯著上升（從正常組織的約 5% 升至 III 期的 18%），成為微環(huán)境的核心 “信號發(fā)送者"。

2. PROS1-MERTK 軸是細胞通訊的 “關鍵樞紐"

通過 CellChat 分析細胞間配體 - 受體互作，發(fā)現(xiàn)：

• PROS1（配體）主要由進展期的 “脂肪形成型癌相關成纖維細胞（adi-CAFs）" 分泌；

• MERTK（受體）主要表達于進展期腫瘤細胞和髓系細胞（如腫瘤相關巨噬細胞）；

• 兩者的互作強度隨進展顯著增強（正常＜I 期＜II 期≤III 期），且通過旁分泌（CAFs→腫瘤細胞）和自分泌（腫瘤細胞自分泌 PROS1）兩種方式促進展。

3. NFYB/FOXP2 調(diào)控 PROS1 轉(zhuǎn)錄，為通路 “上游開關"

通過 SCENIC 轉(zhuǎn)錄因子分析與雙熒光素酶實驗：

• 成纖維細胞中，NFYB 和 FOXP2 可直接結(jié)合 PROS1 啟動子，激活其轉(zhuǎn)錄；

• 敲低 NFYB/FOXP2 后，PROS1 的 mRNA 和蛋白表達下降超 60%，腫瘤細胞的遷移能力顯著減弱。

4. PROS1-MERTK 通過 WNT/TGF-β 通路促進展，MERTK 可作標志物

Western blot 與 GSEA 分析證實：

• PROS1 結(jié)合 MERTK 后，激活下游 WNT/β-catenin 和 TGF-β/SMAD2 通路，促進腫瘤細胞增殖、侵襲；

• TCGA 數(shù)據(jù)庫驗證：MERTK 在進展期 PTMC/PTC 中高表達，且高表達者預后更差（無病生存期縮短 35%），提示 MERTK 可作為 PTMC 進展的潛在標志物與治療靶點。

四、Absin 產(chǎn)品助力：多重熒光試劑盒破解 “蛋白定位難題"

在整個研究中，“PROS1 的細胞來源" 和 “PROS1-MERTK 的組織定位" 是關鍵科學問題，而 Absin Multiplex IHC / 免疫熒光試劑盒（貨號：abs50014）正是解決這一問題的核心工具。

1. 產(chǎn)品信息與應用場景

2. 在文中的具體作用：直接驗證 “adi-CAFs 是 PROS1 的主要來源"

研究團隊使用 abs50014 試劑盒，對不同階段的組織切片進行多重免疫熒光染色，獲得了關鍵證據(jù)：

• 染色靶標：ACTA2（成纖維細胞標志物，紅色）、PROS1（綠色）、DAPI（細胞核，藍色）；

• 結(jié)果：在正常組織和非進展 PTMC 中，ACTA2 + 成纖維細胞與 PROS1 幾乎無共定位；而在進展期 PTMC（II 期）和 PTC（III 期）中，80% 以上的 ACTA2 + 成纖維細胞同時表達 PROS1（紅綠信號重疊率＞75%），直接證實 adi-CAFs 是 PROS1 的主要分泌細胞。

此外，該試劑盒還用于驗證 PROS1 和 MERTK 的組織表達差異：在進展期組織的腫瘤區(qū)域，PROS1 和 MERTK 的熒光信號強度較正常組織提升 3-5 倍，進一步佐證了該軸的激活與疾病進展的關聯(lián)性。

五、總結(jié)與展望：從基礎研究到臨床轉(zhuǎn)化的 “橋梁"

本研究不僅揭示了 PROS1-MERTK 軸在 PTMC 進展中的核心作用，為臨床提供了 “MERTK" 這一潛在標志物與治療靶點，更展示了 “單細胞 + 空間轉(zhuǎn)錄組 + 多重熒光驗證" 的研究范式在癌癥微環(huán)境領域的強大價值。

而 Absin 的 Multiplex IHC/IF 試劑盒（abs50014）作為關鍵驗證工具，憑借其高特異性、多通道兼容的優(yōu)勢，為 “蛋白 - 細胞 - 組織" 的跨尺度機制解析提供了可靠支持。未來，Absin 將持續(xù)推出更優(yōu)質(zhì)的科研工具，助力更多癌癥微環(huán)境、精準醫(yī)學領域的研究突破，為臨床轉(zhuǎn)化提供堅實的技術保障。

（注：原文圖 5B 截圖及產(chǎn)品應用細節(jié)可參考《Advanced Science》2025 年 12 卷 e13474 原文，或聯(lián)系 Absin 技術團隊獲取完整應用方案）

五、Absin 多重熒光免疫組化試劑盒推薦

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