人多能干細(xì)胞的培養(yǎng)方法一、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備1、人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基配制（1）2-8℃解凍hPSCMediumSupplement，融化后上下晃動(dòng)混勻，按實(shí)際用量進(jìn)行分裝，立即使用或儲(chǔ)存于-20-80℃，避免反復(fù)凍融；（2）按1:50的比例將hPSCMediumSupplement（10mL）加入到hPSCMediumBasalMedium(500mL)中，混合均勻即成為人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基（abs9403）。注意：混勻后的人多能干細(xì)胞培養(yǎng)基可在2-8℃穩(wěn)定儲(chǔ)存2-3周，不建議使用配制已超...

細(xì)胞死亡的神秘世界迎來(lái)新成員，鐵死亡以其獨(dú)特的鐵依賴性和脂質(zhì)過(guò)氧化特征，在癌癥治療與疾病干預(yù)領(lǐng)域開(kāi)辟了新戰(zhàn)場(chǎng)。鐵死亡（Ferroptosis）是一種鐵依賴性、脂質(zhì)過(guò)氧化驅(qū)動(dòng)的程序性細(xì)胞死亡形式，自2012年正式命名以來(lái)，已成為腫瘤抑制、神經(jīng)退行性疾病及代謝性疾病研究的熱點(diǎn)。與凋亡、壞死不同，鐵死亡在細(xì)胞形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和遺傳學(xué)上具有獨(dú)特特征，主要表現(xiàn)為線粒體收縮、膜密度增加和脂質(zhì)過(guò)氧化物積累。本文將系統(tǒng)解析鐵死亡的核心信號(hào)通路、關(guān)鍵調(diào)控因子、先進(jìn)研究策略及靶向治療前景，為相關(guān)...

免疫系統(tǒng)的“多面手”不僅吞噬入侵者，更是組織平衡的調(diào)解員。巨噬細(xì)胞作為先天免疫系統(tǒng)的核心組成部分，長(zhǎng)期以來(lái)一直被視為簡(jiǎn)單的“清道夫”細(xì)胞。然而，近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，巨噬細(xì)胞具有驚人的可塑性和多樣性，幾乎參與所有生理和病理過(guò)程。它們不僅能夠吞噬病原體和細(xì)胞碎片，還在組織發(fā)育、穩(wěn)態(tài)維持、修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。隨著新技術(shù)的發(fā)展，巨噬細(xì)胞研究正進(jìn)入一個(gè)全新的階段，揭示了這些細(xì)胞的復(fù)雜性。一、微環(huán)境與巨噬細(xì)胞異質(zhì)性巨噬細(xì)胞的功能高度依賴于其所處的微環(huán)境。不同組織中的巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出不...

WesternBlot（WB）技術(shù)作為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域的核心手段，其實(shí)驗(yàn)流程的嚴(yán)謹(jǐn)性與試劑的穩(wěn)定性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。WB輔助試劑盒（小鼠）專為小鼠來(lái)源樣本的WB實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，整合了實(shí)驗(yàn)全流程所需的關(guān)鍵試劑，極大簡(jiǎn)化了試劑準(zhǔn)備環(huán)節(jié)，助力科研人員高效完成蛋白質(zhì)檢測(cè)工作。完整操作指南遵循以下步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，可保障實(shí)驗(yàn)流程的規(guī)范性與結(jié)果的準(zhǔn)確性，各環(huán)節(jié)關(guān)鍵參數(shù)已經(jīng)過(guò)優(yōu)化驗(yàn)證：1.樣品處理：取制備好的蛋白裂解液，與2*上樣緩沖液按等體積比例混合，充分混勻后于100℃加熱煮沸10min，...

在肝癌治療領(lǐng)域，免疫檢查點(diǎn)抑制劑（ICIs）雖為患者帶來(lái)希望，但仍有大量患者存在治療耐藥問(wèn)題。近期發(fā)表于《SignalTransductionandTargetedTherapy》的一項(xiàng)研究“Transformingacidiccoiled-coil-containingprotein3-mediatedlipidmetabolismreprogrammingimpairsCD8+T-cellcytotoxicityinhepatocellularcarcinoma”，深入探...

DNA甲基化作為表觀遺傳學(xué)的重要研究領(lǐng)域，近年來(lái)已成為國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目中的熱點(diǎn)研究方向。本文將系統(tǒng)解析DNA甲基化研究的完整流程，并提供可申報(bào)國(guó)自然基金的研究方案設(shè)計(jì)。一、DNA甲基化概述及其國(guó)自然研究?jī)r(jià)值DNA甲基化是指在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶催化下，將甲基選擇性地添加到胞嘧啶堿基上的化學(xué)修飾過(guò)程，主要形成5-甲基胞嘧啶（5mC）。這種修飾不改變DNA序列但能遺傳給子代細(xì)胞，在基因表達(dá)調(diào)控、基因組穩(wěn)定性維持、胚胎發(fā)育和疾病發(fā)生中起關(guān)鍵作用。圖DNA甲基化近年來(lái)，國(guó)家自然科學(xué)基...

分子克?。∕olecularCloning）是指將目的DNA片段（如一個(gè)基因）從復(fù)雜的基因組中“復(fù)制”出來(lái)，并將其插入到一種能夠自主復(fù)制的載體（如質(zhì)粒）中，再將這個(gè)重組載體導(dǎo)入宿主細(xì)胞（如大腸桿菌）進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的過(guò)程。簡(jiǎn)單來(lái)說(shuō)，它就是一個(gè)“復(fù)制+粘貼”的過(guò)程，只不過(guò)操作對(duì)象是DNA分子。1、分子克隆的常用方式1.1酶切連接酶切連接法屬于經(jīng)典的分子克隆方法，利用限制性內(nèi)切酶切割目的基因DNA和載體DNA，再利用DNA連接酶連接DNA，最后轉(zhuǎn)化篩選及純化，完成重組基因的大量制備...

動(dòng)物模型，是醫(yī)學(xué)研究者精心構(gòu)建的模擬人類疾病表現(xiàn)的生命載體，其精準(zhǔn)復(fù)刻了疾病的復(fù)雜進(jìn)程與關(guān)鍵特征。主要用于實(shí)驗(yàn)生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)治療學(xué)（包括新藥篩選）研究。比如一些經(jīng)典的動(dòng)物模型———EAE模型、癲癇模型、AD模型、糖尿病模型、腸炎模型、急性胰腺炎模型等。實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)模型[1]造模分子：MOG(35-55)、百日咳毒素(PTX)造模機(jī)制：MOG(35–55)作為自身抗原...