T7 RNA 聚合酶

簡要描述：T7 RNA Polymerase，即T7 RNA 聚合酶，是T7噬菌體DNA編碼的酶，對T7啟動子序列具有高度特異性。本酶是依賴于DNA的RNA聚合酶，具有 5′→3′的RNA聚合酶活性，可以催化單鏈或雙鏈DNA T7啟動子下游NTP的摻入，合成與T7啟動子下游的模板DNA互補的RNA。

產品型號：abs60153
廠商性質：生產廠家
更新時間：2025-11-19
訪問量：2345

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產品分類

Product Category

分子生物學

核酸提取/純化 qPCR系列 mRNA合成轉染產品分子克隆其它分子生物學試劑

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詳細介紹

品牌	absin	純度	≥90%
貨號	abs60153	規(guī)格	50KU；200KU；1000KU
供貨周期	現(xiàn)貨	主要用途	合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA
應用領域	化工,生物產業(yè),農林牧漁,制藥/生物制藥,綜合

T7 RNA 聚合酶

產品描述

描述

本產品是大腸桿菌重組表達來源的噬菌體T7 RNA聚合酶，以含有T7啟動子序列（5’-TAATACGACT CACTATA-3’）的雙鏈DNA為模板，以NTP為底物，合成與啟動子下游的反向單鏈DNA互補的RNA。雙鏈線性平末端或5’突出末端DNA均可作為T7 RNA聚合酶的底物模板，因此線性質粒、PCR產物均可用作體外合成RNA的模板。
產品組成：

編號	組分	100KU	250KU
1	T7 RNA polymerase	400 μL	1 mL
2	10×Transcription Buffer	1 mL	1 mL×2

來源

攜帶T7 RNA聚合酶基因的E. coli

活性

250 U/μL

使用方法

應用實例（體外轉錄實驗，推薦體系）：

需自備試劑：
無酶無菌水（#abs9259），GTP Sodium salt solution（#abs60164），假尿苷三磷酸na鹽溶液（abs60155），N1-甲基-假尿苷三磷酸na鹽溶液（#abs60156），CTP Sodium salt solution（#abs60163），Abs Cap AG（#abs60182），三磷酸腺苷鈉溶液（#abs60542）

1、在RNase free離心管中配制如下混合液

組分	體積（μL）
無菌無酶水	Up to 20
Cap AG（100 mM）（#abs60182）	2
10×Transcription Buffer	2
CTP (100 mM )（#abs60163）	1.3
GTP(100 mM)（#abs60164）	1.3
ATP(100 mM )（#abs60542）	1.3
N1-Methyl-pUTP (100 mM )（#abs60156）	1
模板 DNA	1μg
T7 RNA Polymerase (250 U/μL)	1

注：
a. 反應于室溫配置。
b. 短轉錄本（<100nt），模板可使用 2-4μg，轉錄時間增至 4-8 個小時。
c. 長轉錄本（>1000nt），建議使用質粒線性化模板進行轉錄。
d. 建議在 PCR 儀中進行反應，熱蓋打開，防止長時間導致反應液蒸發(fā)。
e. 反應產物可能有白色沉淀。這是反應過程中游離的焦磷酸與反應液中的鎂離子形成焦磷酸鎂，不影響后續(xù)實驗。如想去除，添加 EDTA 即可消失。添加 EDTA 如果影響后續(xù)實驗，也可以離心回收上清。
f. 使用試劑、容器等無 RNase 污染。
2、輕輕混勻。
3、37℃ 2-3 h。
4、DNase Ⅰ處理（可選）
反應完成后，每管加入 2μL DNase Ⅰ（RNase free），37℃孵育 15min 以去除模板 DNA。
5、產物純化
轉錄后的 RNA 可以選用 RNA Cleaner 磁珠進行純化，也可以采用酚/氯仿純化法，氯化鋰沉淀法或柱純化等，以去除蛋白、游離的核苷酸。純化后的 RNA 經電泳檢測后可進行下游實驗或存儲于-80℃。

儲存/保存方法

-20 ℃以下保存。避免反復凍融或頻繁暴露于溫度變化中，shou次使用時建議進行分裝。產品有效期：12個月。
干冰運輸。

技術指標

buffer：400mM Tris-HCl，450 mMMg(CH3COO)2，20 mM spermidine，100 mM DTT

注意事項

1、DNA模板的種類：推薦使用含T7啟動子的線性化質粒和PCR產物作為模板。
2、轉錄模板的純度會顯著影響體外轉錄反應。在質粒DNA抽提過程中殘留的RNase A會顯著影響轉錄 RNA的質量。通過酚-氯仿抽提的質粒DNA為優(yōu)良模板；PCR產物建議采用膠回收純化后使用。
3、在20 μL反應體系中加入0.02-0.04 U無機焦磷酸酶可顯著提高轉錄產量。
4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

研究領域
研究領域	Drug DiscoverymRNA Drug/Vaccine

T7 RNA 聚合酶溫馨提示：本產品僅作科研實驗使用，不支持臨床等研究

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