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簡要描述：NP-40裂解液充分融解 NP-40 裂解液，之后混勻。取適當(dāng)量的裂解液，使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF（Mw：174.2 g/mol），使其最終濃度為 1mM。
產(chǎn)品型號：abs9160廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2025-11-10訪 問 量：1884產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
| 品牌 | absin | 貨號 | abs9160 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 100mL | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 可使用增強(qiáng)型 BCA 蛋白濃度測定試劑盒測定總蛋白濃度 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
NP-40裂解液
| 產(chǎn)品描述 | |
| 描述 | NP-40，也稱 Nonidet P-40（乙基苯基聚乙二醇），是一種常見的非離子型去垢劑。 |
| 使用方法 | A培養(yǎng)的細(xì)胞樣品： （1）充分融解 NP-40 裂解液，之后混勻。取適當(dāng)量的裂解液，使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF（Mw：174.2 g/mol），使其最終濃度為 1mM。 （2）貼壁細(xì)胞：吸除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍（如果血清中的蛋白沒有干擾，可忽略此步）。按照六孔板的每孔細(xì)胞加入 150-250ul 裂解液的比例加量。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。裂解 15-30 分鐘，通常裂解液接觸細(xì)胞 1-3 秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。 懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，用手指彈散細(xì)胞。按照六孔板的每孔細(xì)胞加入 150-250ul 裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管，然后再裂解。 （3）充分裂解后，10,000-14,000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、WB 和免疫沉淀等實(shí)驗(yàn)。 【裂解液用量說明】：通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150ul 裂解液已經(jīng)足夠，如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200ul 或 250ul。 B組織樣品 （1）將組織jian切成細(xì)小的碎片。 （2）充分融解 NP-40 裂解液，之后混勻。取適當(dāng)量的裂解液，使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入 PMSF（Mw：174.2 g/mol），使其最終濃度為 1mM。 （3）按照每 20mg 組織加入 150-250ul 裂解液的比例加量。 【注意：如果裂解不充分可以適當(dāng)添加用量，如果需要高濃度的蛋白樣品，可適當(dāng)降低用量?！?br style="box-sizing: border-box;-webkit-tap-highlight-color: transparent"/>（4）用玻璃勻漿器勻漿直至充分裂解，此過程盡量控制在 1-2 分鐘內(nèi)，以減少蛋白的降解。 （5）充分裂解后，10,000-14,000g 離心 3-5 分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、WB 和免疫沉淀等實(shí)驗(yàn)。 （6）如果組織樣品本身非常細(xì)小，可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解，通過高強(qiáng)度的漩渦混勻器使樣品裂解充分，之后同樣離心取上清，用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便，不必使用勻漿器，缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解的足夠充分. |
| 儲(chǔ)存/保存方法 | -20℃凍存，有效期12個(gè)月。 |
| 注意事項(xiàng) | 1、裂解樣品的所有步驟都需在冰上或 4℃進(jìn)行。 2、不同的細(xì)胞需要加入的裂解液的量可能會(huì)不同，需要根據(jù)具體條件進(jìn)行條件篩選； 3、為了您的自身安全，使用試劑前，請做好防護(hù)，如穿實(shí)驗(yàn)服，帶手套等。 |
NP-40裂解液溫馨提示：本產(chǎn)品僅作科研實(shí)驗(yàn)使用，不支持臨床等研究
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